[发明专利]一种耐高温链霉菌、微生物土壤还原剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一株热普通链霉菌(Streptomyces thermovulgaris)三炬-11，其特征在于，所述热普通链霉菌(Streptomyces thermovulgaris)三炬-11保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.M2015312。

2.一种微生物土壤还原剂，其特征在于，由以下微生物组成：权利要求1所述热普通链霉菌三炬-11、灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)；

所述权利要求1所述热普通链霉菌三炬-11、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的有效活菌数量比为5～7：7～9：4～6；

所述灰略红链霉菌为灰略红链霉菌三炬-09，保藏编号为CGMCC NO.10247；

所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌三炬-07，保藏编号为CGMCC NO.10248。

3.权利要求2所述的微生物土壤还原剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌分别接种于活化培养基；

(2)将活化后的热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌分别接种于各自种子培养基中，摇床培养，分别得到热普通链霉菌种子液、灰略红链霉菌种子液和灰略红链霉菌种子液；

(3)将步骤(2)所得热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的种子液分别接种于液体发酵培养基中发酵，得到发酵液；

(4)将步骤(3)所得热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的发酵液混合得到微生物土壤还原剂。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述活化培养基的类型根据菌的不同进行调整，具体为：

当菌为热普通链霉菌或灰略红链霉菌时，所述培养基为高氏一号培养基；

当菌为枯草芽孢杆菌时，所述培养基为牛肉膏蛋白胨培养基；

所述热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的培养时间分别为36～48h、36～48h、24～48h；

所述高氏一号培养基包括：可溶性淀粉20g/L、氯化钠0.5g/L、硝酸钾1g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸亚铁0.01g/L、琼脂粉20g/L、蒸馏水1L，高氏一号培养基的pH为7.2～7.4；

所述牛肉膏蛋白胨培养基包括：蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠5g/L、琼脂粉20g/L、蒸馏水1L，牛肉膏蛋白胨培养基的pH为7.4～7.6。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述种子培养基的类型根据菌的不同进行调整，具体为：

当菌为热普通链霉菌或灰略红链霉菌时，所述培养基为不含琼脂的高氏一号培养基；

当菌为枯草芽孢杆菌时，所述培养基为不含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基；

所述摇床培养的条件为37～45℃、150～200rpm。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中不同种子液与液体培养基的体积比独立地为5～10：100；

所述液体发酵培养基由包括以下含量的组分组成：

热普通链霉菌和灰略红链霉菌液体发酵培养基：玉米粉25～35g/L、熟黄豆饼粉5～10g/L、甘油10～15g/L、麸皮浸液25～40g/L、NaNO₃1.0～1.5g/L、CaCO₃1.5～3.0g/L、K₂HPO₄2.5～3.0g/L、MgSO₄0.3～0.5g/L、FeSO₄·7H₂O 0.05～0.1g/L；

枯草芽孢杆菌液体发酵培养基：淀粉25～30g/L，蔗糖4～8g/L，豆粉12～17g/L，磷酸氢二钾2.0～3.0g/L，硫酸锰0.1～0.5g/L，酵母膏0.8～1.5g/L；

所述发酵的条件为37～45℃、150～200rpm；发酵时间为48～72h。