[发明专利]膀胱癌相关的DNA甲基化生物标志物组合和检测试剂盒

说明书

本发明涉及用于膀胱癌检测的DNA甲基化标志物组合及其应用，所述DNA甲基化标志物组合其选自SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.6序列中由CG指示的甲基化位点的任意两种或两种以上的组合，或选自SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.6的完全互补的序列中对应的甲基化位点的任意两种或两种以上的组合。本发明还提供了一种检测膀胱癌试剂盒，包括检测所述的DNA甲基化标志物组合的甲基化程度的试剂。本发明基于所述膀胱癌特异的甲基化位点的甲基化程度，从甲基化程度到诊断的判读完全采用统计学的数学公式，避免了任何在传统尿液FISH检测中涉及人为判定结果的主观性，使得判读上更准确、稳定、可靠。同时，上述甲基化位点组合在判断膀胱癌的发生具有更高的灵敏度。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种膀胱癌相关的DNA甲基化生物标志物组合和检测试剂盒。

背景技术

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，在中国膀胱癌的2014年发病人数为7.8万人/年，并且发病率有逐年上升的趋势。膀胱癌具有发病率高、易复发的特点。血尿为膀胱癌的常见临床症状，其中约17％的血尿患者检出膀胱癌。目前，膀胱癌的主要诊断方法包括影膀胱镜检查、尿脱落细胞学检查、尿液FISH检测及肿瘤标记物检查。其中，膀胱镜检查结合活检组织病理为膀胱镜诊断的金标准，但是该检查方法具有侵入性，容易产生并发症，患者依随性低。而影像学检查对于微小病灶的诊断能力有限，尿脱落细胞学检查的灵敏度低，尿液FISH检测操作复杂、判读结果具有主观性。现有肿瘤标记物检查主要基于尿液中的特定蛋白质的存在进行检测，但由于尿液中测定蛋白的含量低，敏感性及特异性仍然具有局限性。

通过寻找膀胱癌特异性DNA甲基化生物标记物的组合，进行基于多个DNA甲基化位点的检测克服了单个DNA甲基化信号低的问题，提高了检测的灵敏度及特异性。同时，基于DNA甲基化的检测简单易行、判读客观，避免了人为判读结果的主观性，提高了准确率。同时该检测具有非侵入性，能避免膀胱镜检查引发的并发症，提高患者依随性。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种用于膀胱癌诊断的DNA甲基化标志物组合。

实现上述目的的技术方案如下。

一种用于膀胱癌检测的DNA甲基化标志物组合，其选自SEQ ID NO.1至SEQ IDNO.6序列中由【CG】指示的甲基化位点的任意两种或两种以上的组合，或选自SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.6的完全互补的序列中所对应的甲基化位点的任意两种或两种以上的组合。

在其中一些实施例中，所述用于膀胱癌检测的DNA甲基化标志物组合选自SEQ IDNO.2和SEQ ID NO.4的序列中由【CG】指示的甲基化位点组合，或其完全互补序列的甲基化标志物组合；进一步选自SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4的序列中由【CG】指示的甲基化位点组合，或其完全互补序列的甲基化标志物组合；或选自SEQ ID NO.2、SEQ IDNO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5的序列中由【CG】指示的甲基化位点组合，或其完全互补序列的甲基化标志物组合。

在其中一些实施例中，所述用于膀胱癌检测的DNA甲基化标志物组合选自SEQ IDNO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6的序列中由【CG】指示的甲基化位点组合；或其完全互补序列的甲基化标志物组合。

本发明的另一目的是提供上述DNA甲基化标志物在制备检测膀胱癌的试剂盒中应用。

本发明的另一个目的是提供一种检测膀胱癌的试剂盒。

一种检测膀胱癌试剂盒，包括检测上述DNA甲基化标志物组合的甲基化程度的试剂。