[发明专利]一种间充质干细胞培养基

说明书

本发明公开了一种间充质干细胞培养基。研究表明，过度的体外长期传代培养会造成干细胞老化，多向分化能力降低，对疾病的治疗效果也会大打折扣。本发明发现，普鲁兰糖可以降低人羊膜间充质干细胞的老化程度，但是并不明显影响人羊膜间充质干细胞的干细胞特性，不会影响其多向分化能力。因此，可以在人羊膜间充质干细胞培养基中添加有效浓度的普鲁兰糖制成抗人羊膜间充质干细胞老化的培养基。

技术领域

本发明属于生物领域，涉及干细胞培养，具体涉及一种间充质干细胞培养基。

背景技术

羊膜间充质干细胞是一类来源于羊膜的干细胞。与其他来源的干细胞相比，羊膜间充质干细胞具有低免疫原性和免疫抑制的特点，这使得羊膜间充质干细胞的移植副作用较小。羊膜间充质干细胞移植治疗一些炎症相关疾病，取得了较好的效果，相关临床试验在逐步开展。

使用羊膜间充质干细胞治疗疾病，就不可避免的涉及到体外短期或长期传代培养。但是，研究表明，过度的体外长期传代培养会造成干细胞老化，多向分化能力降低，对疾病的治疗效果也会大打折扣。

因此，体外抗老化传代培养研究是体外培养羊膜间充质干细胞的一个重要研究方向。

发明内容

本发明旨在提供一种普鲁兰糖体外抗人羊膜间充质干细胞老化和制备人羊膜间充质干细胞培养基方面的应用。

本发明目的通过以下技术方案实现：

一种普鲁兰糖用于体外抗人间充质干细胞老化的用途。β-半乳糖苷酶染色法是一种基于衰老时SA-β-Gal活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的方法，从而在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。β-半乳糖苷酶染色结果表明，在培养基中加入普鲁兰糖可以有效延缓人羊膜间充质干细胞的衰老。

进一步地，所述间充质干细胞为羊膜间充质干细胞。

一种普鲁兰糖在制备抗人间充质干细胞老化的培养基中的应用。

进一步地，所述间充质干细胞为羊膜间充质干细胞。

有益效果：

本发明发现，普鲁兰糖可以降低人羊膜间充质干细胞的老化程度，但是并不明显影响人羊膜间充质干细胞的干细胞特性，不会影响其多向分化能力。因此，可以在人羊膜间充质干细胞培养基中添加有效浓度的普鲁兰糖制成抗人羊膜间充质干细胞老化的培养基。

附图说明

图1为人羊膜间充质干细胞的流式细胞术结果；

图2为各组不同代次人羊膜间充质干细胞SA-β-Gal染色阳性率。

具体实施方式

下面结合具体的实施例来介绍本发明的实质性内容，但不能以此限定本发明保护范围。

实施例1：普鲁兰糖抗人羊膜间充质干细胞老化的药效

一、实验材料

D-Hanks液购自广州沛瑜生物制品有限公司。

胰蛋白酶购自上海恒渡生物科技有限公司。

Ⅱ型胶原酶购自爱必信(上海)生物科技有限公司。

DMEM/F12培养基、FBS和青链霉素购自Gibco公司。

普鲁兰糖(CAS号9057-02-7)购自上海源叶生物科技有限公司，纯度≥99％。

流式鉴定使用到的荧光标记流式抗体为Beckman公司产品。

β-半乳糖苷酶染色试剂盒购自上海源叶生物科技有限公司。

二、实验方法