[发明专利]一种非营养型芽孢萌发剂及其应用

说明书

本发明公开了一种非营养型芽孢萌发剂及其应用，芽孢萌发剂由溶菌酶、阳离子表面活性剂、盐、有机酸和水混合而成，所述芽孢萌芽剂的pH为4.0‑7.0。该芽孢萌发剂通过添加特定比例的溶菌酶，水解芽孢皮层的肽聚糖，进而激活芽孢萌发反应。在pH 4.0‑7.0范围内，芽孢可快速萌发生长。通过在嗜热脂肪芽孢杆菌培养基中添加特定比例的芽孢萌发剂，以制备出芽胞恢复生长培养基，促进嗜热脂肪芽胞杆菌芽胞发芽，并恢复至营养菌体繁殖阶段。

技术领域

本发明属于微生物培养基领域，具体涉及一种非营养型芽孢萌发剂及其应用。

背景技术

在生存条件恶劣下，如营养物质不充分、代谢废物累积等，产芽胞菌种生长停滞，产生芽胞。芽胞是营养细胞的休眠体，在较长时间内保持休眠状态，能抵抗多种外界压力，如高温，高压，高寒，营养缺乏等。在合适条件下，通常是在营养物质的激活下，同芽胞营养性发芽受体结合，引发细胞内级联信号转导，诱导芽胞发芽并恢复营养菌体生长。芽胞发芽是微生物芽胞在暴露于能支持微生物生长的条件之后发生的一系列不可逆、复杂的生化事件，使芽胞进入营养菌体繁殖阶段。芽胞的高度抗逆性提高了细菌的存活，也可利用其高度的抗性进行灭菌监测。

生物指示剂是灭菌监测的金标准，通过标准化的菌株及符合要求的抗力来对特定灭菌过程进行监测。生物指示剂中所用菌株比器械或敷料上真实的微生物负荷的抗力更大，因此通过生物指示剂可对灭菌过程进行检测，保证灭菌有效性。

嗜热脂肪芽胞杆菌对热具有较高抗性，嗜热脂肪芽胞杆菌芽胞比其营养菌体的热抗性更强，常用作压蒸汽灭菌生物指示剂的指示菌种。包含有芽胞的生物指示剂在进行活菌计数，抗力测试或灭菌结束进行培养时，需诱导芽胞发芽生长。在芽胞恢复生长培养基的诱导下芽胞发芽并生长，但普通培养基诱导芽胞发芽率极低。

专利CN201610273256.9公开了一种芽胞恢复生长培养基，其由液体或固体基质和发芽因子组成。公开的发芽因子为酵母浸膏、或磷酸二氢钾、或磷酸氢二钾、或组氨酸、或脯氨酸、或L-缬氨酸、或L-亮氨酸、或淀粉、或葡萄糖、或肌酐、或吡啶二羧酸DPA、或吡啶二羧酸钙盐CaDPA中的一种或多种。

专利CN 107475173A公开了一种湿热脂肪芽孢杆菌芽孢培养助剂，培养基及应用，其公开的培养助剂为果糖、DL-色氨酸、谷胱甘肽和对氨基苯甲酸。用于促进芽孢的加快萌发。

现有技术具有以下缺陷：以上两篇专利公开的均为促进芽孢恢复生长的因子均为营养性萌发剂，营养性萌发剂的储存条件受环境影响较大，配置好的带萌发剂的恢复生长培养基保存的有效期较短。

发明内容

目的：为解决现有技术的不足，本发明提供一种非营养型芽孢萌发剂及其应用。

技术方案：为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

第一方面，提供一种非营养型芽孢萌发剂，所述芽孢萌发剂由溶菌酶、阳离子表面活性剂、盐、有机酸和水混合而成，所述芽孢萌芽剂的pH为4.0-7.0。

在一些实施例中，所述芽孢萌发剂原料组分及其质量百分比为：

在一些实施例中，所述的阳离子表面活性剂为1,12-十二烷胺、月桂胺、十二烷氧基丙胺中的一种或几种。

在一些实施例中，所述盐为氯化钾、氯化钠、硫酸钾、硫酸钠中的一种或几种。

在一些实施例中，所述有机酸为柠檬酸、丁二酸、草酸、羟基乙酸中的一种或几种。

在一些实施例中，所述的非营养型芽孢萌发剂需要经过灭菌处理方可以使用，优选的，所述芽孢萌发剂经过121℃高压蒸汽灭菌15min处理。

第二方面，提供所述的非营养型芽孢萌发剂在嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢的萌芽及恢复生长中的应用。