[发明专利]促进马铃薯试管苗繁育的复合菌剂及其制备和使用方法

权利要求书

1.一种促进马铃薯试管苗繁育的复合菌剂，其中，该复合菌剂的功能菌种包括嗜盐假芽孢杆菌（Fictibacillus halophilus）、戈壁芽孢杆菌（Bacillus gobiensis）和全罗北道薄层菌（Hymenobcter jeollabukensis）；

所述嗜盐假芽孢杆菌、所述戈壁芽孢杆菌和所述全罗北道薄层菌的有效活菌数比为（1~3）：（2~5）：（2~5）。

2.根据权利要求1所述的复合菌剂，其中，该复合菌剂为液态复合菌剂或固体粉状复合菌剂。

3.根据权利要求2所述的复合菌剂，其中，所述液态复合菌剂包括缓冲液和功能菌种；所述功能菌种在复合菌剂中的总有效活菌数浓度为10⁹~10¹²CFU/mL。

4.根据权利要求2所述的复合菌剂，其中，所述固体粉状复合菌剂包括功能菌种和维持菌种存活的添加剂，所述功能菌种在复合菌剂中的总有效活菌数浓度为10⁹~10¹²CFU/g。

5.根据权利要求2-4任一项所述的复合菌剂，其中，所述功能菌种中，所述嗜盐假芽孢杆菌、所述戈壁芽孢杆菌和所述全罗北道薄层菌的有效活菌数比为1:2:2。

6.根据权利要求3所述的复合菌剂，其中，所述缓冲液包括pH为7.2的K₂HPO₄-KH₂PO₄缓冲液。

7.权利要求1~6任一项所述复合菌剂的制备方法，其包括以下步骤：

将功能菌种嗜盐假芽孢杆菌、戈壁芽孢杆菌和全罗北道薄层菌分别进行活化、培养获得指数生长中后期的培养液，培养液离心重悬分别获得各个功能菌种；

按照各个功能菌种的有效活菌数比例制备成液态或固体粉状的复合菌剂。

8.权利要求1~6任一项所述复合菌剂在促进马铃薯试管苗繁育中的应用。

9.一种促进马铃薯试管苗繁育的方法，其包括以下步骤：

取权利要求1~6任一项所述复合菌剂与高温高压灭菌后温度降至约50~55℃的MS培养基混合均匀，迅速转入培养瓶中；待凝固后，插入马铃薯试管苗的茎段，于光照培养。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，MS培养基中，每毫升MS培养基中初始接种的功能菌种总有效活菌数为10³~10⁷CFU。

11.根据权利要求9所述的方法，其中，MS培养基中，每毫升MS培养基中初始接种的功能菌种总有效活菌数为10⁵CFU。

12.根据权利要求9所述的方法，其中，光照培养的温度为25~30℃，培养时间为3~6d。