[发明专利]一种血管紧张素转换酶校准品的制备方法

权利要求书

1.一种血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

配制缓冲液；

将猪肺加入所述缓冲液中进行研磨匀浆获得猪肺匀浆液，将所述猪肺匀浆液离心，取上清液获得第一混合液；

在所述第一混合液中加入硫酸铵，获得第二混合液；

将所述第二混合液静置、离心，取第二混合液的沉淀物，在所述沉淀物中加入配制的所述的缓冲液进行溶解，透析去除硫酸铵，获得血管紧张素转换酶粗液；

将蛋白稳定保护剂加入配制的所述缓冲液中，获得含有蛋白稳定保护剂的缓冲液；

将所述血管紧张素转换酶粗液加入所述含有蛋白稳定保护剂的缓冲液中稀释，获得血管紧张素转换酶校准品。

2.如权利要求1所述的血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，

所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、磷酸缓冲液、硼酸缓冲液、MES缓冲液中的一种或几种组合。

3.如权利要求1所述的血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，

所述缓冲液pH为7～9，浓度为20mmol/L～80mmol/L。

4.如权利要求1所述的血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，

在所述猪肺匀浆液离心步骤中，离心速度为6000rpm～10000rpm，离心时间为20min～40min。

5.如权利要求1所述的血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，

在所述第一混合液中加入硫酸铵步骤中，所述硫酸铵的终浓度为2.6mol/L。

6.如权利要求1所述的血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，

在获得血管紧张素转换酶粗液步骤中，先对所述第二混合液静置过夜，再对其进行离心，离心速度为8000rpm，离心时间为30min，后取沉淀物。

7.如权利要求1所述的血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，

在获得血管紧张素转换酶粗液步骤中，所述缓冲液的温度为2℃～8℃。

8.如权利要求1所述的血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，

在获得含有蛋白稳定保护剂的缓冲液步骤中，所述蛋白稳定保护剂是由无机盐、糖类、多元醇及防腐剂组成。

9.如权利要求8所述的血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，

所述蛋白稳定保护剂中的无机盐为氯化钠，其终浓度为0.1mol/L～0.5mol/L，所述蛋白稳定保护剂中的糖类为葡萄糖、蔗糖、海藻糖、葡聚糖中的一种或几种组合，其终浓度为1g/L～50g/L。

10.如权利要求9所述的血管紧张素转换酶校准品的制备方法，其特征在于，

所述蛋白稳定保护剂中的多元醇为甘露醇、甘油、山梨醇中的一种或几种组合，其终浓度为1g/L～50g/L，所述蛋白稳定保护剂中的防腐剂为叠氮钠、Proclin300、硫酸新霉素中的一种或几种组合，其终浓度为0.1g/L～5g/L。