[发明专利]含有三环氧化物结构的二萜类化合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种含有三环氧化物结构的二萜类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)、将臭牡丹粉碎，用乙醇水溶液回流提取得提取液；将所述提取液浓缩得到浸膏，将所述浸膏用水溶解得到混悬液，将所述混悬液用石油醚萃取，取石油醚层，得萃取液；

2)、将所述萃取液经过硅胶柱层析，以体积比为100:0、100:1、80:1、50:1、30:1、20:1和10:1、5:1、2:1、0:1的石油醚-乙酸乙酯为流动相进行梯度洗脱，收集洗脱液，用薄层色谱对各个洗脱液进行检测，根据检测结果按照洗脱顺序，依次得到10个馏分，分别命名为Fr.A～Fr.J；

3)、取馏分Fr.F，减压浓缩，浓缩液经硅胶柱层析，以体积比为(0～20):1的石油醚-丙酮为流动相进行洗脱，收集洗脱液，用薄层色谱对各个洗脱液进行检测，根据检测结果按照洗脱顺序依次得到6个馏分，分别命名为Fr.01～Fr.06；

4)、取馏分Fr.03减压浓缩后，以甲醇-水为流动相，经制备液相色谱对浓缩液进行洗脱，收集10min～14min的洗脱液，减压浓缩后，干燥，得到二萜类化合物；

所述二萜类化合物具有以下结构式：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤2)中，每一梯度所述流动相的用量为3～5个柱体积，每一份洗脱液按所述柱体积的1/6～1/4收集，得到120份洗脱液；

以10％硫酸乙醇为显色剂，用薄层色谱在366nm和日光下检测各个洗脱液，合并色谱行为相似的第1～18、第19～26、第27～39、第40～54、第55～67、第68～73、第74～83、第84～93、第94～106、第107～120洗脱液，得到馏分Fr.A～Fr.J。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤3)中，所述洗脱为梯度洗脱，梯度个数为2～6个，每一梯度所述流动相的用量为3～5个柱体积，每一份洗脱液按所述柱体积的1/6～1/4收集，得到60份洗脱液；

以10％硫酸乙醇为显色剂，用薄层色谱在366nm和日光下检测各个洗脱液，合并色谱行为相似的第1～15、第16～18、第19～26、第27～38、第39～47、第48～60洗脱液，得到馏分Fr.01～Fr.06。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在步骤3)中，所述流动相为体积比为(5～20):1的石油醚-丙酮。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤3)中，所述梯度洗脱的梯度个数为4个，各个梯度的流动相依次为体积比为20:1、15:1、10:1和5:1的石油醚-丙酮。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤4)中，所述制备液相色谱的色谱柱为C18柱，所述流动相为体积浓度为40％～60％的甲醇-水，收集11min～12min的洗脱液。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述流动相的流速为1.5mL/min～3mL/min。

8.根据权利要求1～7任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤2)所采用的硅胶的粒径为80目～100目，步骤3)所采用的硅胶的粒径为200目～300目。

9.根据权利要求1～7任一项所述的制备方法，其特征在于，在步骤1)中，所述乙醇水溶液中乙醇的体积浓度为60％～95％；所述回流提取的次数为3～5次，每次1h～2h。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述乙醇水溶液中乙醇的体积浓度为70％～75％。