[发明专利]微生物复合菌剂、微胶囊化复合微生态制剂和肉兔饲料及制备方法与应用

说明书

本发明提供微生物复合菌剂、微胶囊化复合微生态制剂和肉兔饲料及制备方法与应用，涉及微生物技术领域。微生物复合菌剂包括迟缓芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌。可以显著改善动物肠道微生态环境，提高肉兔饲料的转化率，达到快速增重的目的。本发明提供的微胶囊化复合微生态制剂，选取微生物复合菌剂为芯材，被包裹的益生菌能在动物肠道中释放，能够抵御宿主机体内高胃酸和胆盐等不利环境，更加便于运输和长期保存。本发明提供的肉兔饲料，可以明显提高肉兔饲料的利用率，缩短肉兔的生长周期。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体提供微生物复合菌剂、微胶囊化复合微生态制剂和肉兔饲料及制备方法与应用。

背景技术

随着养殖业的迅猛发展，益生菌产品越来越备受关注。益生菌又名益生素、微生态制剂，作为抗生素的一种安全无毒替代品，益生菌不仅可以提高畜禽养殖业的产量和动物产品的质量，而且可以替代抗生素类药物。大量研究证实，益生菌有多种生理功能，如：增强机体免疫功能，调节动物肠道微生态环境，抑制有害病菌的繁殖，提高饲料的转化率，维持动物健康并促进生长等，但要达到预期功效，益生菌的数量需要足够数量才行。由于益生菌自身较脆弱受周围环境因素的影响较大，致使定植于动物肠道的菌体数量和活力不够，难以启到应有的功效。因此，如何高效提升动物肠道益生菌活菌数量和活力已成为养殖业亟待解决的问题。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种微生物复合菌剂及其应用和相关产品。

本发明提供一种微生物复合菌剂，包括迟缓芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌。与单一功能菌相比，微生物复合菌剂具有功能强和性能稳定的优势，能够有效调节肠道微生态平衡，有效抑制或杀死肠道内病原菌。发明人经研究发现，该微生物复合菌剂，利用菌株本身的益生菌性能和之间的协同作用，可以显著改善动物肠道微生态环境，改善益生菌肠道定植存活率，调节肠道菌群平衡，提高饲料利用率，降低养殖成本，有利于动物营养物质的消化与吸收，达到快速增重的目的。

在一些实施方式中，迟缓芽孢杆菌可以为迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)MES857，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，购买地址是北京市朝阳区酒仙桥中路24号院6号楼，购买日期为2018年7月23日，保藏编号为CICC 10365；

贝莱斯芽孢杆菌可以为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)MES861，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2018年12月3日，保藏编号为CGMCCNo.16857。

为了达到较好的协同效果，迟缓芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的发酵液按体积比为(1-3)：(1-3)；迟缓芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的芽孢率均独立地不低于98％；此外，微生物复合菌剂为液体制剂，迟缓芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的活菌数均独立地为3.0×10⁹-4.0×10¹⁰CFU/mL。

为了得到更多的菌株原料，迟缓芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的培养可以根据如下方式进行：

迟缓芽孢杆菌高密度液体发酵：

(1)菌种制备：取保存于-80℃的迟缓芽孢杆菌MES857甘油管，解冻后，在培养基上进行三区划线，经3-5次纯化培养后，得到单菌落。

(2)菌种活化：用无菌接种环挑取试管斜面的菌苔，在250mL茄瓶斜面培养基上均匀划线，于28℃-33℃培养至完全产孢。

菌种制备和活化培养基，按质量分数计，具体为：胰蛋白胨0.8％-1％，牛肉浸取物0.8％-1.5％，NaCl 0.3％-0.5％，MnSO₄·H₂O 0.01％-0.05％，琼脂1.5％-2％，其余为去离子水，pH6.5-7.0，121℃，灭菌20-30min。