[发明专利]从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法

权利要求书

1.一种从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(一)菌种分离：将含有驯化菌种的活性污泥混合液、NaCl溶液、Na₅P₃O₁₀溶液、Tween80溶液混合均与得到接种液，再将接种液倍比稀释接种到乙酸钠限制性固体培养基上，在28±0.5℃条件下培养6～10天后挑选单菌落分别划线纯化培养；

(二)菌种富集：将纯化培养得到的菌株分别放入MOPS-乙酸钠液体培养基，在28±0.5℃、180r/min的环境中振荡培养3～5天，得到富集菌液；

(三)高效脱氮菌筛选：在无菌条件下将富集菌液和自配水按5∶3的体积比混匀，并加入占富集菌液和自配水总体积0.2～1.2％不具有脱氮活性污泥混合液，在10～50r/min的厌氧环境中振荡培养2.5～3.5h后转入另一容器内加入占富集菌液和自配水总质量1.5～2％的NH₄Cl，然后曝气使溶解氧浓度为0.5～5mg/L，检测氨氮含量，选出脱氮效果最为明显的脱氮菌株。

2.根据权利要求1所述的从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，其特征在于，所述接种液按体积比由20％含有驯化菌种的活性污泥混合液、78.8％NaCl溶液、1％Na₅P₃O₁₀溶液和0.2％Tween80组成。

3.根据权利要求1所述的从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，其特征在于，所述NaCl溶液中NaCl质量分数为0.9％，所述Na₅P₃O₁₀溶液中Na₅P₃O₁₀的质量分数为0.104％，所述Tween80溶液中Tween80的体积分数为4％。

4.根据权利要求1所述的从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，其特征在于，所述乙酸钠限制性固体培养基pH值为7.0，1000mL乙酸钠限制性固体培养基由3.68g的CH₃COONa，17.2mg的CaC1₂·2H₂O、28.73mg的Na₂HPO₄·2H₂O、12g的HEPES、57.27mg的NH₄Cl、15g的琼脂、131.82mg的MgSO₄·7H₂O、1000ml蒸馏水和26.74mg的K₂SO₄组成。

5.根据权利要求1所述的从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，其特征在于，所述MOPS-乙酸钠液体培养基pH值为7.0，1000mLMOPS-乙酸钠液体培养基由3.68g的CH₃COONa，17.2mg的CaC1₂·2H₂O、28.73mg的Na₂HPO₄·2H₂O、12g的HEPES、57.27mg的NH₄Cl、131.82mg的MgSO₄·7H₂O、1000ml蒸馏水和26.74mg的K₂SO₄组成。

6.根据权利要求1所述的从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，其特征在于，1000mL所述自配水中含有10mgMgCl₂、0.1mgCuSO4、5mgCaCl₂、0.1mgMnSO4和0.1mgZnCl₂。

7.根据权利要求1所述的从序批式吡啶废水活性污泥中分离、筛选高效脱氮菌的方法，其特征在于，所述自配水COD值为500mg/L，自配水氨氮值为50mg/L，自配水pH值为7.5。