[发明专利]一种高效体外培养脐血CIK细胞的培养基及培养方法有效
| 申请号： | 201911379927.X | 申请日： | 2019-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN110938595B | 公开（公告）日： | 2021-09-28 |
| 发明（设计）人： | 谭啸;谭新民 | 申请（专利权）人： | 谭啸 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 饶文君;蔡学俊 |
| 地址： | 350001 福建省*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高效 体外 培养 cik 细胞 培养基 方法 | ||
1.一种高效体外培养CIK细胞的培养基，其特征在于，所述培养基组分为：在AlyS505N-0无血清基础培养基中添加细胞因子组合物A和中药提取物B；其中细胞因子组合物A为浓度为20-200IU/ml 的IL-1α、浓度为500-2000IU/ml的IL-2、浓度为20-100μg/ml的Lymactin-T；中药提取物B为浓度1-5μg/ml的虫草素、浓度1-5μg/ml的人参皂苷、浓度3-7.5μg/ml的紫杉醇、浓度4-7μg/ml的茯苓多糖、浓度2-6μg/ml的黄芪甲苷和浓度3-5μg/ml的姜醇。
2.根据权利要求1所述的一种高效体外培养CIK细胞的培养基，其特征在于：所述中药提取物B为浓度2μg/ml的虫草素、浓度4μg/ml的人参皂苷、浓度4.5μg/ml的紫杉醇、浓度4μg/ml的茯苓多糖、浓度2.5μg/ml的黄芪甲苷和浓度4μg/ml的姜醇。
3.一种利用如权利要求1所述培养基高效体外培养CIK细胞的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）采集健康脐带血并分离脐带血单个核细胞，向核细胞中加入AlyS505N-0基础培养基，轻轻吹打，重悬混匀，转入细胞培养瓶中，细胞接种浓度为1.5×106个/ml，加入800IU/ml的IFN-γ，置入37℃，6%CO2饱和湿度下培养；
（2）培养至24小时，按培养基组分添加细胞因子组合物A，继续置于37℃，6%CO2饱和湿度下培养；
（3）培养至72小时，按培养基组分添加含中药提取物B和300-800IU/ml IL-2的AlyS505N-0基础培养基，并继续置于37℃，6%CO2饱和湿度下培养；
（4）之后每隔2-3天，补充添加含300-800IU/ml IL-2的AlyS505N-0基础培养基，共培养15-17天得到大量的CIK细胞。
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