[发明专利]一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白及其生产方法与应用有效
申请号: | 201911381263.0 | 申请日: | 2019-12-27 |
公开(公告)号: | CN113045670B | 公开(公告)日: | 2022-11-01 |
发明(设计)人: | 王晓冰;冯赛祥;罗开健;施建鑫;李伟业;陈爱华 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/21;A61K47/64;A61P31/12;C12R1/19 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 苏运贞 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 可溶性 干扰素 融合 蛋白 及其 生产 方法 应用 | ||
1.一种可溶性鸡α干扰素融合蛋白,其特征在于:包括鸡α干扰素、连接肽与鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白,鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白、连接肽与鸡α干扰素依次连接;
所述的可溶性鸡α干扰素融合蛋白的氨基酸全序列如SEQ ID NO.1所示。
2.编码权利要求1所述的可溶性鸡α干扰素融合蛋白的基因。
3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于:如SEQ ID NO.2所示。
4.一种重组载体,其特征在于:含有权利要求2或3所述的可溶性鸡α干扰素融合蛋白的编码基因。
5.一种重组表达菌株,其特征在于:含有权利要求4所述的重组载体。
6.一种利用基因工程技术生产权利要求1所述的可溶性鸡α干扰素融合蛋白的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)将编码鸡α干扰素的基因、编码连接肽的基因和编码鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白的基因依次连接,得到融合基因序列;
(2)将步骤(1)所得的融合基因序列克隆入表达载体,得到重组载体;
(3)将步骤(2)得到的重组载体转入宿主菌株,得到重组表达菌株;
(4)培养步骤(3)得到的重组表达菌株,表达,收集菌液,分离纯化获得可溶性鸡α干扰素融合蛋白。
7.根据权利要求6所述的利用基因工程技术生产可溶性鸡α干扰素融合蛋白的方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的融合基因序列如SEQ ID NO.2所示;
步骤(2)中所述的表达载体为pET28a(+);
步骤(3)中所述的宿主菌株为大肠杆菌BL21(DE3);
步骤(4)中所述的表达为诱导表达;诱导剂为IPTG;
所述的分离纯化的方法为镍柱亲和层析法。
8.权利要求1所述的可溶性鸡α干扰素融合蛋白在制备鸡病毒性疾病药物中的应用。
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