[发明专利]一种用于检测人体的尿液标本中肿瘤细胞的检测试剂盒

说明书

本发明首先提供一种用于检测人体的尿液标本中肿瘤细胞的检测试剂盒，所述试剂盒包括过滤膜、细胞固定物和常规染色用的染料，所述过滤膜的滤孔为穿透膜厚度方向的直孔道，且滤孔的孔径为5～20微米，过滤膜的厚度为30微米以下，所述细胞固定物中包含甲醛和/或多聚甲醛，所述染料中包含苏木素。本发明所述试剂盒耗时短，检测速度快，可以用于快速病理检测；且检测步骤简单，尿液样品不需要繁琐的前期预处理；以及样品处理量大，提高检出率，减少假阴性。

技术领域

本发明涉及肿瘤细胞的检验检测领域，具体涉及一种用于检测人体的尿液标本中肿瘤细胞的检测试剂盒。

背景技术

在人体患有肾癌和膀胱癌等泌尿系统癌症时，人体的尿液标本中可能会含肿瘤细胞。如何快速、有效、准确地判断这些尿液标本中是否含恶性肿瘤细胞，具有十分重要的临床意义。现有广泛使用的尿液中肿瘤细胞的检测方法一般为：收集尿液标本，离心后取细胞沉淀，固定包埋成石蜡块保存，切片染色在显微镜下找恶性肿瘤细胞。此方法步骤过多，耗时长(3-7天)，对数量极少的肿瘤细胞容易漏诊。

专利CN201721589654公开了一种膀胱癌胶体金免疫检测试剂盒，所述检测试剂盒包括试纸条、上样垫、金标垫以及吸水纸，所述试纸条的上样端的上方叠置所述上样垫、金标垫，试纸条的另一端上叠置所述吸水纸，所述试纸条的底面结合有PVC底板；所述试纸条上靠近所述上样端设有检测线，靠近所述吸水纸的一端设有质控线；所述标金垫上包被有胶体金标记的单克隆抗体ABC71，所述检测线上包被有AG-CD71抗原。该专利的检测试剂能够高效检测膀胱癌患者尿液中的肿瘤细胞，灵敏度高，特异性强，方便快捷，成本低廉，节省患者就医费用。但利用吸水纸来吸取尿液中的肿瘤细胞，使得该试剂盒对应的方法对膀胱癌患者的检出率大受限制，因此该试剂盒难以得到普及推广。

因此，本领域需要提供一种新的用于检测人体的尿液标本中肿瘤细胞的检测试剂盒。

发明内容

我们开发了一种基于膜过滤技术快速富集肿瘤细胞的方法用于快速分离富集诊断尿液标本中的肿瘤细胞。其原理为通过膜过滤技术直接分离尿液标本中的细胞，其中红细胞和白细胞被去除(如果有的话)，上皮细胞、间皮细胞和肿瘤细胞等体积较大的细胞被牢固的吸附固定在过滤膜上。整个过滤过程一步完成，无需前期处理步骤，过滤完成后过滤膜可以进行各种下游染色(如HE染色即苏木精—伊红染色，巴氏染色，免疫组化染色)。

因此，本发明首先提供一种用于检测人体的尿液标本中肿瘤细胞的检测试剂盒，所述试剂盒包括过滤膜、细胞固定物和常规染色用的染料，所述过滤膜的滤孔为穿透膜厚度方向的直孔道，且滤孔的孔径为5～20微米，过滤膜的厚度为30微米以下，所述细胞固定物中包含甲醛和/或多聚甲醛，所述染料中包含苏木素。

本发明中，所述过滤膜的直孔道是指膜上的通孔为垂直膜面的垂直孔道或倾斜孔道，该滤孔不是弯曲孔道或无规孔道。

在一种具体的实施方式中，所述试剂盒中还包括过滤器，所述过滤器包括过滤柱和用于控制液体流动的阀门。

在一种具体的实施方式中，所述过滤膜为径迹蚀刻膜，且所述径迹蚀刻膜的厚度为25微米以下，优选20微米以下，更优选15微米以下。

本发明中，过滤膜的厚度过厚则容易堵塞孔道。在现有技术中包含规整直孔道且厚度够薄的过滤膜中，径迹蚀刻膜是最合适的，而光刻膜的厚度很难达到这个要求。

在一种具体的实施方式中，所述过滤膜为孔径均匀且孔径在7～9微米的径迹蚀刻膜。

在一种具体的实施方式中，所述试剂盒还包括用于封片的浓度为20～60wt％的甘油。

在一种具体的实施方式中，所述细胞固定物为细胞固定液，且所述细胞固定液为浓度为2.5～20wt％的多聚甲醛溶液或浓度为4～50wt％的甲醛溶液。