[发明专利]一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法

说明书

本发明提出了一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，通过利用电子穿刺图谱技术(Electropenetrography/the Electrical Penetration Graph，EPG)来实现监测蚜虫在油菜植株上的取食行为，并在这一基础上，分析出不同品种油菜之间的抗蚜性大小。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法。

背景技术

油菜属十字花科芸薹属，目前生产上栽培的有三种类型：甘蓝型、芥菜型和白菜型油菜。油菜是仅次于谷类作物的世界第二大食物能源，是世界上大豆和棉花之后第三个主要的可食用油资源。

然而，油菜生长期常常受到病虫害的影响，制约产量的增加。大量的病虫害侵袭，造成油菜大面积毁种和缺苗断垄，严重影响油菜生长。在作物生长过程中，受到十字花科害虫和病原体的侵害，并且近些年入侵率持续增加，使油菜的产量受到严重的制约。其中，影响最大的虫害就是蚜虫。蚜虫是油菜上的重要害虫，是刺吸式口器的代表性昆虫，取食植物时将口针刺入植物组织表皮细胞和薄壁细胞间，插入筛管内，口针分泌出胶状唾液和水状唾液保护口针并且防止植物组织愈合，从而可以长时间不断地取食植物韧皮部汁液，获得碳水化合物，氨基酸，矿物质，维生素以及大分子物质。在生长初期，蚜虫多集中于油菜叶背或嫩叶部取食，造成叶片变色、卷曲以及褶皱；在开花结角期，该虫多群集于花蕾、花梗或荚果处，造成花梗扭曲，荚果畸形，从而出现有花不能结角，有果籽不实的现象，严重时可造成植株死亡，而且蚜虫还可以增加病毒传播。

到目前为止，抗虫油菜品种还没有商业化。农民倚赖杀虫剂来抑制蚜虫，但选择压导致蚜虫已经对许多杀虫剂产生了抗性。此外，杀虫剂对环境的消极影响表明替代的防治策略和培育抗性品种是急需的。而培育抗性品种，首先要定位植株上的抗性因子，才能找到着手点。了解蚜虫探测和取食的行为对于研究植株对蚜虫的适应性，探索抗性因子有着重要的意义。

传统鉴定油菜抗蚜的方法都是以在室内和田间接种蚜虫之后，观察油菜植株的感蚜的情况来确定，需要花费大量的人力，物力和财力，而且还要长期在室内饲养蚜虫种群，如果不保存这些物种，需要从田间去采集，田间的蚜虫长期受到农药的影响，产生较大的抗药性，对实验的作物也会长期产生适应性，造成评估的不准确。而且受到气候的影响较大，如果不适发的年限，蚜虫及病毒病均不易采集到，实验也会受到影响。而且传统的方法人为地因素太多，需要大量的重复来降低人为的影响，实验数据也存在较大的变化，且不能根据实验结果知道潜在的抗性机理及深层的原因。并且传统的方法对蚜虫和病毒病的抗性鉴定需要各自进行接种鉴定，不能一同进行评估。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，通过利用电子穿刺图谱技术(Electropenetrography/the Electrical PenetrationGraph，EPG)来实现监测蚜虫在油菜植株上的取食行为，并在这一基础上，分析出不同品种油菜的抗蚜性大小。

为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：

一种采集蚜虫对油菜取食行为的EPG参数的方法，包括如下步骤：

(1)将甘蓝蚜用导电银胶将金丝一端固定于背部后，放置于繁育蚜虫的植株上过夜适应；同时选择油菜植株作为测试对象；

(2)将金丝的另外一端接到DC-EPG系统上，同时将植物电极插入植株土壤中，再将饥饿处理后且连接金丝的甘蓝蚜置于油菜植株上，在法拉第笼中进行试验；

当甘蓝蚜的口针刺入植物组织时，由甘蓝蚜口针为微电极和植物根部土壤为参比电极构成的回路接通，获取甘蓝蚜在油菜植株上对应至少6h取食行为所产生的一系列电信号；

(3)将上述电信号经DC-EPG系统放大处理后，转化成数字信号，再以波形数据的形式进行记录，获取蚜虫在油菜上对应取食行为的EPG波形；