[发明专利]人血清白蛋白磁性仿生免疫分析试剂盒

权利要求书

1.一种人血清白蛋白磁性分子印迹聚合物仿生抗体，其特征在于：该仿生抗体包括人血清白蛋白磁性分子印迹聚合物微球，所述磁性分子印迹聚合物微球包括磁性纳米微球、包覆在所述磁性纳米微球表面的氨基功能层以及包覆在所述氨基功能层上的人血清白蛋白分子印迹聚合物层；

所述人血清白蛋白分子印迹聚合物层是以通过氨基二氧化硅吸附在磁性纳米微球表面的人血清白蛋白为模板分子，以能够在含有表面活性剂的水相体系中快速水解的硅烷试剂为单体，通过一种基于酸碱催化的溶胶-凝胶法合成分子印迹聚合物并在合成后去除其所含模板分子而形成的；

所述水相体系为体积分数0.01％～0.5％的吐温溶液，硅烷试剂为3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷。

2.根据权利要求1所述一种人血清白蛋白磁性分子印迹聚合物仿生抗体，其特征在于：所述人血清白蛋白磁性分子印迹聚合物微球的粒径为500～700nm，磁性纳米微球的粒径为400～600nm。

3.如权利要求1所述的人血清白蛋白磁性分子印迹聚合物仿生抗体的制备方法，其特征在于：该仿生抗体的制备方法包括以下步骤：

1)制备磁性纳米微球；

2)在磁性纳米微球表面包覆氨基二氧化硅，得到氨基修饰磁性纳米微球复合物；

3)以人血清白蛋白作为模板分子，将氨基修饰磁性纳米微球复合物和人血清白蛋白混合后通过震荡使氨基修饰磁性纳米微球复合物吸附人血清白蛋白，得到载有人血清白蛋白的氨基磁性纳米微球复合物；

4)将载有人血清白蛋白的氨基磁性纳米微球复合物与硅烷试剂于含有表面活性剂的水相体系中混合，通过震荡使所得混合体系中的硅烷试剂水解后调节体系pH值，然后通过震荡并于碱性催化条件下在模板分子所附着的磁性纳米微球上形成分子印迹聚合物，得到结合有模板分子的磁性分子印迹聚合物微球；

5)除去步骤4)得到的磁性分子印迹聚合物微球表面的分子印迹聚合物上结合的模板分子，得到人血清白蛋白磁性分子印迹聚合物微球。

4.根据权利要求3所述的仿生抗体的制备方法，其特征在于：所述步骤5)中，采用洗脱溶剂除去所述模板分子，所述洗脱溶剂为SDS-醋酸溶液混合物，其中醋酸和SDS的含量均为2％～5％。

5.根据权利要求3所述的仿生抗体的制备方法，其特征在于：所述仿生抗体的制备方法还包括以下步骤：经过步骤5)后，封闭所述人血清白蛋白磁性分子印迹聚合物微球表面的非特异性吸附残基。

6.根据权利要求3或5所述的仿生抗体的制备方法，其特征在于：所述步骤3)具体包括以下步骤：将10～40mg氨基修饰磁性纳米微球复合物与1～3mL 125～2000μg/mL人血清白蛋白PBS溶液混合后于20～40℃震荡0.5～2h，然后依次经固液分离、洗涤，得到载有人血清白蛋白的氨基磁性纳米微球复合物；所述步骤4)具体包括以下步骤：将步骤3)制备得到的载有人血清白蛋白的氨基磁性纳米微球复合物及1.25～30μL硅烷试剂加入5～10mL0.01％～0.5％的吐温溶液中后于20～40℃震荡2～4h，然后通过氨水调节pH值为8.0～9.5，然后于20～40℃震荡10～16h，然后经固液分离得到结合有模板分子的磁性分子印迹聚合物微球。

7.一种人血清白蛋白仿生免疫分析试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括对人血清白蛋白具有识别功能的仿生抗体，以及可以与人血清白蛋白竞争性结合该仿生抗体的检测标记物，所述仿生抗体包括人血清白蛋白磁性分子印迹聚合物微球，所述磁性分子印迹聚合物微球包括磁性纳米微球、包覆在所述磁性纳米微球表面的氨基功能层以及包覆在所述氨基功能层上的人血清白蛋白分子印迹聚合物层；

所述人血清白蛋白分子印迹聚合物层是以通过氨基二氧化硅吸附在磁性纳米微球表面的人血清白蛋白为模板分子，以能够在含有表面活性剂的水相体系中快速水解的硅烷试剂为单体，通过一种基于酸碱催化的溶胶-凝胶法合成分子印迹聚合物并在合成后去除其所含模板分子而形成的；

所述水相体系为体积分数0.01％～0.5％的吐温溶液，硅烷试剂为3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷。