[发明专利]一种防治小鹅瘟的口服缓释抗体的制备方法

说明书

本发明提供了一种防治小鹅瘟的口服缓释抗体的制备方法，该口服缓释抗体的有效组分及其体积份数比为：含小鹅瘟卵黄抗体的卵黄匀浆70‑90份、抗酸剂0.1‑0.2份、正辛酸0.05‑0.15份、甲醛0.05‑0.15份、蔗糖0.1‑0.2份、海藻酸钠0.1‑0.2份。本发明中抗酸剂可以使抗体口服后仍能通过消化道和胃粘膜刺激免疫应答，保持活性；同时本发明中加入了蔗糖和海藻酸钠，保证了口服卵黄抗体适口性和缓释作用，提高了抗体效率持续时间。

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种防治小鹅瘟的口服缓释抗体的制备方法。

背景技术

在非洲猪瘟和禽流感的风口下，人类生活中水禽动物源性食品备受青睐，水禽养殖量也在逐日增多，并呈集约化发展，养殖量直线上升的同时其疫病的防控也极为关键。长期以来水禽方面，小鹅瘟的危害最大，其为鹅细小病毒引起的雏鹅急性败血性传染病，发病雏鹅或雏番鸭的死亡率高达90％-100％，对养鹅业的发展影响极大，尤其是小鹅瘟不仅可以感染鹅，在一定程度上也可感染番鸭等其他禽类，因此搞好小鹅瘟的预防和治疗工作尤为关键。目前，小鹅瘟疫病的防治主要是采用疫苗免疫及母源被动免疫，其保护期较短(仅2个月左右)，存在空窗期，同时注射免疫应激大，减食、生长受抑等严重，造成目前养殖者生物防控意识不强。

卵黄抗体具有性质稳定、特异性强、制备成本低、口服安全等优点在家禽、家畜传染病的防治中已得到广泛的应用。产品的开发也在生态农业和食品安全方面产生了良好的经济效益和社会效益。在诊断、预防和治疗人类和动物各种疾病中具有良好的应用价值。

鉴于此，二者的有效结合成为水禽养殖业的新希望。

发明内容

本发明的目的在于提供一种防治小鹅瘟的口服缓释抗体的制备方法，该方法可以解决常规卵黄抗体注射免疫应激大而引起减食、生长受抑等弊端。

本发明另一个目的在于解决了现有技术下卵黄抗体口服活性和稳定性差，抗体效力时间短的问题，本发明中加入抗酸剂、蔗糖和海藻酸钠后，保护了消化道酸性环境对抗体的破坏，同时实现了有效物质的缓释，延长了抗体的效力时间。

为达到上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

1、一种防治小鹅瘟的口服缓释抗体的制备方法，其有效组分及其体积份数比为：含小鹅瘟卵黄抗体的卵黄匀浆70-90份、抗酸剂0.1-0.2份、正辛酸0.05-0.15份、甲醛0.05-0.15份、蔗糖0.1-0.2份、海藻酸钠0.1-0.2份。

而且，所述的抗酸剂为抗酸剂为柠檬酸盐，可以为柠檬酸钠和柠檬酸钾的其中一种。

2、一种防治小鹅瘟的口服缓释抗体的制备方法，包括以下步骤：

(1)采用小鹅瘟灭活疫苗对200日龄蛋鸭进行首次免疫，用量1ml/只，首次免疫7天后进行二次免疫1ml/只，二免后14天进行再次加强免疫1ml/只，检测小鹅瘟血清抗体效价至1:512～1:1024时收集高免蛋；

(2)取步骤(1)中所收集的高免蛋洗净消毒，而后收集蛋黄，充分搅拌，使蛋黄呈均匀膏状，加入与蛋黄等体积的灭菌注射水，搅拌混匀后，60～65℃保温灭活30分钟，得卵黄匀浆备用；

(3)向步骤(2)分离的卵黄匀浆边搅拌边加入浓度为0.1％的正辛酸，充分搅拌0.5～1.5小时，室温放置2～6小时后，以4200～5500r/min的转速离心15min，弃沉淀；用孔径5μm和1μm的筒式滤芯过滤上清液，再经截留分子量为10kD的中空纤维超滤柱进行浓缩3～4倍后再用NaOH调整PH值为6.8～7.0，并以0.45μm和0.22μm筒式滤芯过滤除菌。

(4)取步骤(3)所述滤液，按体积比依次加入甲醛、蔗糖、抗酸剂和1％-1.5％海藻酸钠，37℃-45℃控温搅拌1～2h后于37℃灭活2h，定量分装，加盖密封，2～8℃保存，即得到所述一种防治小鹅瘟的口服缓释抗体。