[发明专利]一种辅助提取弱极性-非极性目标物的抗乳化沉淀剂及其应用

说明书

本发明公开了一种协助弱极性‑非极性目标物提取的抗乳化沉淀剂及其应用，特点是该抗乳化沉淀剂主要由以下原料及其配比组成：1 mol/L乙酸铵缓冲溶液500 mL、聚乙二醇2 g、低级醇200 mL、乙腈500 mL和正辛醇20 mL，用甲酸调整pH至4.8；使用方法包括以下步骤：加入待测样品等体积的乙醇、9倍体积的抗乳化沉淀剂和5倍体积的非极性溶剂，高速匀浆，离心10分成两层清液，收集上层清液，然后再用待测样品5倍体积的非极性溶剂重复提取1～2次，合并所有上清液得到全部弱极性‑非极性目标物组分，优点是不仅能克服非极性溶剂提取时的乳化现象，而且具有强的沉淀作用和去杂质的净化作用，对于奶制品等基质还具有破乳作用。

技术领域

本发明涉及一种针对食品和生物基质的沉淀净化剂，尤其是涉及一种辅助提取弱极性-非极性目标物的抗乳化沉淀剂及其应用。

背景技术

正己烷、石油醚等非极性溶剂，常用来提取非极性-弱极性范围的脂溶性目标物，不仅萃取效率高，而且和水不相溶而分层，十分便于分离。然而，对于复杂基质食品如婴幼儿配方奶粉、饲料、含淀粉的食品、动物内脏等来说，当体系含有水时，用非极性溶剂漩涡混合萃取时，极易形成乳化现象，有机相和水相分层不明显，甚至完全混为一体，分离十分困难，不仅费时，萃取的回收率和重复性等指标质量低下。尤其在奶粉样品中，非极性溶剂甚至无法破乳，油脂等非极性组份完全被包裹，极难游离出来，无法提取到。常用的蛋白沉淀试剂如三氯乙酸、乙酸溶液（5-10%）等沉淀效果较差；用高氯酸溶液（5%）虽然沉淀效果极佳，但对于酸性或强氧化性敏感的目标物破坏性很强，回收率差。亚铁氰化钾配合乙酸锌作为蛋白沉淀澄清剂，利用乙酸锌与亚铁氰化钾反应沉淀效果明显，除蛋白质能力非常强，然而并不能破乳，部分目标物容易被包裹在沉淀内，造成回收率低下。总之，食品和生物基质中的弱极性-非极性组分的提取，既要破乳使得待测组分从基质充分游离出来，又必须防止非极性提取溶剂混匀提取时出现乳化现象。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种不仅能克服非极性溶剂提取时的乳化现象，而且具有强的沉淀作用和去杂质的净化作用，对于牛奶和奶粉等奶制品等基质还具有破乳作用的辅助提取弱极性-非极性目标物的抗乳化沉淀剂及其应用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种协助弱极性-非极性目标物提取的抗乳化沉淀剂，该抗乳化沉淀剂主要由以下原料及其配比组成：乙酸铵缓冲溶液500mL、聚乙二醇2 g、低级醇200 mL、乙腈500 mL和正辛醇20 mL，用甲酸调整pH至4.8。

所述的低级醇为甲醇或乙醇，所述的乙酸铵缓冲液的浓度为1 mol/L。

上述协助弱极性-非极性目标物提取的抗乳化沉淀剂的使用方法，包括以下步骤：

（1）对于含水的待测样品（如肌肉、内脏、水果、蔬菜等），加入待测样品等体积的乙醇；对于不含水的干样品（如婴幼儿配方奶粉、淀粉类、动物饲料等），加入干样品等重量的水，充分漩涡混匀后得到待测样品，加入待测样品等体积的乙醇；

（2）然后加入待测样品9倍体积的抗乳化沉淀剂和5倍体积的非极性溶剂，以10000 rmp高速匀浆2 min，接着以4000转/min离心10 min，分成两层清液，收集上层清液，然后再用待测样品5倍体积的非极性溶剂重复提取1～2次，合并所有上清液，得到弱极性-非极性目标物组分。

所述的非极性溶剂为正己烷。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

1、适合所有弱极性-非极性目标化合物的提取和净化，通用性好。完全符合相似相溶原理，适可适用的目标检测物如下（不止列举的这些，仅仅举例）：

A. 弱极性营养物：脂肪酸、油脂、维生素A、E、D、K等；

B. 食品污染物：氯丙醇酯、缩水甘油酯、多环芳烃等；