[发明专利]小肠结肠炎耶尔森氏菌的种特异性检测分子标签3283、3316及其快速检测方法有效
| 申请号： | 201911393772.5 | 申请日： | 2019-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN110923349B | 公开（公告）日： | 2022-12-06 |
| 发明（设计）人： | 吴清平;刘鸣;王涓;丁郁;张菊梅;叶青华;陈谋通;薛亮;吴诗;雷涛;庞锐;吴浩明 | 申请（专利权）人： | 广东省科学院微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）;广东环凯生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/10;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;王兰兰 |
| 地址： | 510000 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 小肠 结肠炎 耶尔森氏菌 特异性 检测 分子 标签 3283 3316 及其 快速 方法 | ||
1.小肠结肠炎耶尔森氏菌的特异性检测分子标签3283作为被检测靶标在鉴别小肠结肠炎耶尔森氏菌中的应用，其特征在于，所述分子标签3283的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；存在所述分子标签3283则为小肠结肠炎耶尔森氏菌，所述应用为非疾病诊断治疗目的。
2.检测如权利要求1所述分子标签3283的引物对在制备鉴定小肠结肠炎耶尔森氏菌试剂中的应用，其特征在于，所述引物对的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示、下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示；若所述引物对的扩增产物出现大小350bp的条带则判定样品中含有小肠结肠炎耶尔森氏菌，若所述引物对的扩增产物未出现350bp大小的条带则判定样品中不含有小肠结肠炎耶尔森氏菌。
3.一种非疾病诊断治疗目的的检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待检测微生物的DNA，以提取的DNA为模板，采用如权利要求2所述的引物对进行PCR扩增；
(2)将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，电泳结果出现大小350bp的条带则判定样品中含有小肠结肠炎耶尔森氏菌，若电泳结果未出现350bp大小的条带则判定样品中不含有小肠结肠炎耶尔森氏菌。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PCR反应条件为：95℃预变性5min，95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸20s，共30个循环，72℃延伸5min。
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