[发明专利]一种用于检测BRAF基因K601E突变的引物、探针及试剂盒有效
申请号: | 201911396858.3 | 申请日: | 2019-12-31 |
公开(公告)号: | CN110777208B | 公开(公告)日: | 2020-04-14 |
发明(设计)人: | 张宇清;裴婷婷;赵艳伟 | 申请(专利权)人: | 上海润安医学科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12N15/11 |
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地址: | 201204 上海市浦东新区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 braf 基因 k601e 突变 引物 探针 试剂盒 | ||
1.一种用于检测BRAF基因K601E突变的引物和探针,其特征在于,检测引物为SEQ IDNO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,质控引物为SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列,探针为SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列,且所述探针的5’端修饰有FAM荧光基团,3’端修饰有NFQ-MGB非荧光淬灭基团。
2.一种用于检测BRAF基因K601E突变的试剂盒,其特征在于,含有权利要求1所述的引物和探针。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,含有阳性对照品和阴性对照品,所述阳性对照品为含有BRAF 基因K601E突变的基因组DNA与BRAF基因野生型的基因组DNA的混合液,所述阴性对照品为含有BRAF基因野生型的基因组DNA溶液。
4.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包括PCR反应液及50×ROX。
5.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,使用方法包括以下步骤:
(1)样本DNA提取;
(2)配制PCR反应体系;
(3)设置PCR扩增条件;
(4)进行实时荧光PCR扩增反应,根据荧光PCR仪的扩增结果按照质控标准对样本是否发生BRAF 基因K601E突变进行判断。
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