[发明专利]一种高效截短侧耳素的提取工艺

说明书

本发明公开了兽用抗生素领域的一种高效截短侧耳素的提取工艺，所述的提取工艺包括以下具体步骤：S1：将醋酸丁酯与截短侧耳素菌丝体以2：1~6：1的重量份数比在浸提罐内混合后，于20~40℃温度下在空气浴振荡器振摇转速0~210r/min进行提取5‑30min，提取1~4次；S2：通过密闭式陶瓷膜或不锈钢膜的滤液为浸取液，未通过的残液一部分返回至浸提罐内，另一部分通过循环泵后再次通过密闭式陶瓷膜或不锈钢膜循环过滤；S3：将得到的滤液经过蒸发浓缩、结晶、过滤和干燥，得到截短侧耳素。选择醋酸丁酯作为提取溶剂，在工艺条件上保证了较高的提取效率的同时明显减少了溶剂的使用量，降低了生产成本，并简化了提取步骤，同时提高了生产环境对于员工的整体安全性，易于推广。

技术领域

本发明涉及兽用抗生素技术领域，具体为一种高效截短侧耳素的提取工艺。

背景技术

截短侧耳素(Pleuromutilin)是由侧耳菌(Pleurotus mutilus)产生的一类广谱的二萜烯类抗生素，它通过作用于细菌核糖体50S亚基，抑制蛋白质合成，导致菌体死亡。截短侧耳素类是一大类具有较好抗菌活性的抗生素家族，主要用作家禽和家畜的饲料添加剂，在饲料中添加该类物质，可有效预防许多传染病，例如能够有效抑制革兰氏阳性菌，尤其以葡萄球菌、链球菌最为明显，同时对于支原体感染也有治疗作用。截短侧耳素还用作截短侧耳素类半合成衍生物的前体，目前已有衍生物泰妙菌素和沃尼妙林，它的许多衍生物的抑菌活性和范围比截短侧耳素强，同时抗菌谱更广泛。

目前关于截短侧耳素的提取工艺方面的研究报道较少。针对二萜类化合物的提取仍多采取冷浸、渗漉、回流等传统方法，也可利用新技术如超声、微波提取、超临界CO2萃取等达到高效、节能、环保提取的目的，但新型技术多数尚未在生产中应用。国内截短侧耳素的生产厂家采取的提取工艺过程主要采取板框过滤后甲醇浸提法，此工艺在实际工业应用过程中对生产环境毒性、刺激性大，危害员工健康且甲醇存在闪点低、易燃易爆等缺陷。国外近年也有专利报道甲基异丁基甲酮(MIKB)一步法对全发酵液进行提取及纯化的生产工艺，但经对比发现此工艺，虽然简化了操作，但溶剂消耗量较大，成本偏高。

而且在相同的萃取条件下，冰醋酸、水盒正己烷对截短侧耳素的提取效率低下。甲醇、丙酮能与水混溶，实际生产应用时将在后期纯化过程中遇到水溶性杂志难以去除的问题。氯仿毒性较强，较不利于安全生产。

基于此，本发明设计了一种高效截短侧耳素的提取工艺，以解决上述提到的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高效截短侧耳素的提取工艺，因此本发明改进了提取前菌体的预处理方式，对提取过程中的提取时间、转速、液料比等影响因素进行优化 ，使得溶剂的使用量大幅减少 ，降低整体生产成本，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种高效截短侧耳素的提取工艺，所述的提取工艺包括以下具体步骤：

S1：将醋酸丁酯与截短侧耳素菌丝体以2：1~6：1的重量份数比在浸提罐内混合后，于20~40℃温度下在空气浴振荡器振摇转速0~210r/min进行提取5-30min，提取1~4次；

S2：通过密闭式陶瓷膜或不锈钢膜的滤液为浸取液，未通过的残液一部分返回至浸提罐内，另一部分通过循环泵后再次通过密闭式陶瓷膜或不锈钢膜循环过滤；

S3：将得到的滤液经过蒸发浓缩、结晶、过滤和干燥，得到截短侧耳素。

优选的，所述步骤S1为：将醋酸丁酯与截短侧耳素菌丝体以4：1的重量份数比在浸提罐内混合后，于25℃温度下在空气浴振荡器振摇转速140r/min进行提取10min，提取2次。

优选的，所述浸提罐在0.2~0.6MPa压力下通过孔径为1µm~20nm的密闭式陶瓷膜或不锈钢膜内进行过滤。

优选的，所述晶体干燥至干燥失重低于1%，干燥所用设备为真空烘箱或者双锥干燥机。