[发明专利]D-木酮糖4-差向异构酶、其突变体及其用途在审

专利信息
申请号: 201911404948.2 申请日: 2019-12-31
公开(公告)号: CN113122528A 公开(公告)日: 2021-07-16
发明(设计)人: 张以恒;周伟 申请(专利权)人: 中国科学院天津工业生物技术研究所
主分类号: C12N9/90 分类号: C12N9/90;C12N15/61;C12P19/24;C12P19/02
代理公司: 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 代理人: 刘新宇;李茂家
地址: 300308 天津*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 木酮糖 差向异构 突变体 及其 用途
【权利要求书】:

1.一种多肽,所述多肽具有D-木酮糖4-差向异构酶活性,其中,所述多肽选自由(a)-(d)组成的组中的任一项:

(a)由与SEQ ID NO:2-32任一项所示的序列具有至少60%、至少70%、至少80%或至少90%的序列同一性的序列编码的多肽;

(b)由多核苷酸编码的多肽,所述多核苷酸在非常高严格条件下与(i)或(ii)所示的多核苷酸杂交:

(i)编码如SEQ ID NO:2-32任一项所示的氨基酸序列的多核苷酸;

(ii)(i)的全长互补多核苷酸;

(c)多肽,所述多肽为如SEQ ID NO:2-32任一项所示的多肽的突变体,所述突变体在一个或多个位置处包含取代、重复、缺失或添加一个或多个氨基酸,并且所述多肽仍然具有D-木酮糖4-差向异构酶活性;以及

(d)由(a)、(b)、(c)所示的多肽的片段,并且所述片段具有D-木酮糖4-差向异构酶活性。

2.根据权利要求1所述的多肽,其中,所述多肽为突变体,并且所述多肽与SEQ ID NO:2-32任一项所示的多肽相比,具有至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%的序列同一性。

3.根据权利要求1-2任一项所述的多肽,其中,所述多肽为如SEQ ID NO:2-32任一项所示的多肽的突变体,所述突变体在至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个位点处包含氨基酸的突变,并且所述多肽仍然具有D-木酮糖4-差向异构酶活性。

4.根据权利要求1-3任一项所述的多肽,其中,所述多肽为如下所示的多肽:

(a)与SEQ ID NO:2所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点处包含突变,其中,所述位点为选自由102、125、131、161、163、266、267、297、306、318、337、394、402和403组成的组中的一种或多种;

(b)与SEQ ID NO:3所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由102、125、131、161、163、266、267、297、306、318、337、394、402和403组成的组中的一种或多种;

(c)与SEQ ID NO:4所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由102、125、131、161、163、266、267、297、306、318、337、394、402和403组成的组中的一种或多种;

(d)与SEQ ID NO:5所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由105、128、134、164、166、270、271、301、310、322、341、398、406、407组成的组中的一种或多种;

(e)与SEQ ID NO:6所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由105、128、134、164、166、269、270、300、309、321、340、397、405、406组成的组中的一种或多种;

(f)与SEQ ID NO:7所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由117、140、146、176、178、

285、286、316、325、337、355、412、420、421组成的组中的一种或多种;

(g)与SEQ ID NO:8所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由125、148、154、184、186、293、294、324、333、345、363、420、428、429组成的组中的一种或多种;

(h)与SEQ ID NO:9所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由124、147、153、183、185、297、298、328、337、349、368、425、433、434组成的组中的一种或多种;

(i)与SEQ ID NO:10所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由108、131、137、167、169、276、277、307、316、328、346、403、411、412组成的组中的一种或多种;

(j)与SEQ ID NO:11所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由115、138、144、174、176、280、281、311、320、332、351、408、416、417组成的组中的一种或多种;

(k)与SEQ ID NO:12所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由107、130、136、166、168、272、273、303、312、324、343、400、408、409组成的组中的一种或多种;

(l)与SEQ ID NO:13所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由109、132、138、168、170、275、276、306、315、327、346、403、411、412组成的组中的一种或多种;

(m)与SEQ ID NO:14所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由103、126、132、162、164、267、268、298、307、319、338、395、403、404组成的组中的一种或多种;

(n)与SEQ ID NO:15所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由105、128、134、164、166、271、272、302、311、323、342、399、407、408组成的组中的一种或多种;

(o)与SEQ ID NO:16所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由64、88、94、123、125、236、237、267、274、286、373、381、382组成的组中的一种或多种;

(p)与SEQ ID NO:17所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由110、133、139、169、171、271、272、302、311、323、342、399、407、408组成的组中的一种或多种;

(q)与SEQ ID NO:18所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由102、125、131、161、163、266、267、297、306、318、337、394、402、403组成的组中的一种或多种;

(r)与SEQ ID NO:19所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由121、144、150、180、182、289、290、320、329、341、359、416、424、425组成的组中的一种或多种;

(s)与SEQ ID NO:20所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由107、130、136、166、168、273、274、304、313、325、344、401、409、410组成的组中的一种或多种;

(t)与SEQ ID NO:21所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由21、48、54、84、86、182、183、213、222、234、260、324、332、333组成的组中的一种或多种;

(u)与SEQ ID NO:22所示的序列相比,所述多肽的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸在对应于以下位点包含突变,其中,所述位点为选自由30、55、61、91、93、202、203、233、242、254、273、330、338、339组成的组中的一种或多种。

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