[发明专利]一株产香叶醇的葡萄汁有孢汉逊酵母及其发酵方法

说明书

本发明公开了一株产香叶醇的葡萄汁有孢汉逊酵母及其发酵方法，属于发酵工程技术领域。本发明的葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)A14 CGMCC No.18666产香叶醇的能力高，发酵48h香叶醇的浓度可达63.48μg/L，而其他白酒发酵过程中的优势酵母产生香叶醇的最高含量仅为43.59μg/L；在白酒酿造过程中加入含有葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)A14 CGMCC No.18666的菌剂，可显著提高白酒中的香叶醇含量，并提升白酒的风味和营养价值。

技术领域

本发明涉及一株产香叶醇的葡萄汁有孢汉逊酵母及其发酵方法，属于发酵工程技术领域。

背景技术

萜类物质是组成植物挥发物的重要成分，香叶醇作为白酒中无环单萜类物质，具有温和、香甜的玫瑰花气息，同时还具有一定的保健功能。将香叶醇应用于酿造酒业以及其他食品领域，可显著改善发酵食品的风味并提高食品的保健效果。

由于香叶醇在白酒发酵过程中产生的含量较低，目前工业上往往通过基因工程构建具有香叶醇生产能力的菌株，如在酿酒酵母中进行代谢流重排，或者在大肠杆菌等不具备香叶醇生产能力的模式微生物中构建香叶醇合成途径，以提高香叶醇产量，但这些基因工程菌株由于存在安全隐患，在白酒等食品领域并不适用。部分已报道的未进行基因改造的原始菌株，如酿酒酵母，其发酵48h香叶醇的浓度仅为10-40μg/L。目前关于如何提高白酒中香叶醇含量的相关报道较少。因此，从原位体系内筛选高产香叶醇的菌株，并在发酵过程中进行生物强化，是提高白酒中香叶醇的含量、提升白酒品质和营养价值的重要途径。

发明内容

针对现有的技术难点及存在的问题，本发明提供了一种高产香叶醇的葡萄汁有孢汉逊酵母及其发酵生产香叶醇的方法，并将其应用于白酒发酵中，以提高香叶醇的含量并增加白酒的风味和营养价值。

本发明的第一个目的是提供一株葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)A14，已于2019年10月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.18666，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

本发明的第二个目的是提供一种葡萄汁有孢汉逊酵母CGMCC No.18666发酵生产香叶醇的方法，包括如下步骤：

(1)将葡萄汁有孢汉逊酵母CGMCC No.18666单菌落至装有5mL青稞汁培养基的25mL试管中，自然pH，30℃，200rpm，培养36h成为种子培养液；

(2)将培养好的种子培养液以5％的接种量接种在装有50mL青稞汁培养基的250mL三角瓶中，自然pH，30℃，发酵48h。

本发明的第三个目的是提供含有葡萄汁有孢汉逊酵母CGMCC No.18666的多种形式的酵母菌剂。

在本发明的一种实施方式中，所述葡萄汁有孢汉逊酵母CGMCC No.18666菌剂的形式包括液体菌剂和固体菌剂。

本发明的第四个目的是提供含有葡萄汁有孢汉逊酵母CGMCC No.18666的液体菌剂和固体菌剂的制备方法。

在本发明的一种实施方式中，所述液体菌剂的制备方法为：挑取葡萄汁有孢汉逊酵母CGMCC No.18666菌株接种于YPD液体培养基中，25～35℃培养24～48h。

在本发明的一种实施方式中，所述固态制剂的制备方法为：将葡萄汁有孢汉逊酵母CGMCC No.18666菌株接种到YPD液体培养基中，25～35℃培养24～48h后真空干燥制成固体菌剂。

本发明的第五个目的是提供一种含有葡萄汁有孢汉逊酵母CGMCC No.18666的菌剂在白酒酿造中的应用方法。