[发明专利]一种纳米金属氧化物纯化HSA的方法

说明书

本发明涉及了一种纳米金属氧化物纯化HSA的方法，具体步骤为：将纳米金属氧化物加入到带HSA的血清稀释液中，常温孵育，然后将纳米金属氧化物分离出来，剩余溶液中为纯化的HSA。本发明利用纳米金属氧化物大量吸附除了HSA以外的蛋白质的同时，特异性的不吸附或少吸附HSA，直接将纳米金属氧化物分离除去其他杂蛋白，剩余溶液中即为纯的HSA，无需洗脱步骤，从而一步实现HSA的纯化，该方法操作简单，成本低，HSA纯化速度快，纯度高，具有显著的应用价值。

技术领域

本发明涉及生物层析材料技术领域，具体涉及一种纳米金属氧化物纯化HSA的方法。

背景技术

人血清白蛋白(Human Serum Albumin，简称HSA)是现代医学中的一种十分重要的生物制品,在临床上主要作为血浆容量扩充剂而广泛应用于出血性休克、烧伤、癌症、白蛋白过少症等，也是疫苗生产、干细胞培养的重要原料。

目前市面上所用的HSA制品多数都是由人源血浆经过分级过滤提取得到的。1946年Cohn等人首先利用在一定条件下血浆蛋白在乙醇中溶解度差异而实现多种血浆蛋白的分离和纯化。《中国药典》(2010版)规定的HSA的纯化流程是以健康人血浆为原料，用低温乙醇法或其他获得批准的纯化方法纯化，并采用60℃10h加热灭活病毒。因为冷乙醇沉淀法产量高，产品基本无热原，乙醇能除去或抑制HIV等病毒，但其设备相对复杂，产品纯度不高。其他沉淀剂有：硫酸铵、辛酸盐和利凡诺等。1983年研究人员应用色谱集成技术纯化HSA减少了蛋白质聚集和变性。多级色谱法在HSA的纯度、产率等方面均优于冷乙醇沉淀法。分离纯化蛋白质非常有效的离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等方法正在逐步取代以前的方法，但是仍存在操作复杂，时间较长等问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种纳米金属氧化物纯化HSA的方法，可实现一步纯化血清中的HSA，操作简单，可实现自动化。

为了解决上述技术问题，本发明提供以下技术方案：

提供一种纳米金属氧化物纯化HSA的方法，具体步骤如下：

将纳米金属氧化物加入到带HSA的血清稀释液中，常温孵育，然后将纳米金属氧化物分离出来，剩余溶液中为纯化的HSA。

按上述方案，血清稀释液的浓度为1-2mg/ml，纳米金属氧化物与血清稀释液的质量体积比为2-20mg:1mL。

按上述方案，纳米金属氧化物为磁性纳米Fe₃O₄、磁性纳米NiFe₂O₄、磁性纳米CoFe₂O₄、磁性纳米ZnFe₂O4、磁性纳米CuFe₂O₄、磁性纳米γ-Fe₂O₃或纳米α-Fe₂O₃。

按上述方案，磁性纳米Fe₃O₄通过共沉淀法制备；磁性纳米NiFe₂O₄、磁性纳米CoFe₂O₄、磁性纳米ZnFe₂O4、磁性纳米CuFe₂O₄和纳米α-Fe₂O₃通过水热法制备；磁性纳米γ-Fe₂O₃由Fe₃O₄通过高温氧化法制备。

按上述方案，纳米金属氧化物纳米尺寸为20-3000nm。

按上述方案，分离纳米金属氧化物的方式为磁分离或离心分离。

按上述方案，孵育时间为0.5-1h。