[发明专利]胸腺醌及其与自噬抑制剂ATG7-siRNA的联合使用在制备治疗食管癌的药物中的应用

说明书

本发明涉及胸腺醌TQ在制备治疗食管癌的组合物中应用。该应用中包括胸腺醌TQ的单独使用、以及胸腺醌TQ与siRNA的联合使用。本发明的发明人发现TQ可以调控食管癌细胞包括ATG7、Bectlin‑1和LC3B在内的几个涉及自噬的关键因子的表达水平，从而实现对食管癌的治疗。进一步的，本发明的发明人还发现了基于食管癌细胞自噬促进剂siRNA与TQ联合使用具有协同抑制食管癌细胞增殖的特性。

技术领域

本申请涉及胸腺醌及其与自噬抑制剂ATG7–siRNA的联合使用在制备治疗食管癌的药物中的应用。

背景技术

全世界每年约30万人死于食管癌。我国是食管癌的高发区之一，在全国恶性肿瘤死亡总数中占22.34％，仅次于胃癌，居第二位。在我国以华北地区发病率最高，河南省林县占首位。我国食管癌发病率男性高于女性，但高发区男女比例接近，发病年龄多在40岁以上。食管癌多发生于食管中段，约占50％以上；食管癌是指发生于食管的癌病。是发生于食管黏膜上皮的恶性肿瘤。研究表明，胸腺醌(TQ，如下所示。)是一种生物活性化合物，是紫花奈氏菌种子的主要成分，具有多抗生物活性。通过调节凋亡活性抑制肿瘤生长，然而，很少有研究报道其对食管癌的影响；一般治疗食管癌的药物存在耐药性和药物毒副作用，也是治疗食管癌失败的主要原因，所以就推动了天然，低毒，高效的生物药物的研究。

siRNA通常是一段长20～24bp的双股RNA(dsRNA)，其两股分别在 RNA的两端超出另一端2个核苷酸，每一股各有一个5’磷酸基末端与一个3’羟基末端。此结构是利用一种称为dicer的酶处理而得，这种酶可以将较长的双股RNA或小发夹RNA(small hairpin RNA)切成siRNA。此外， siRNA也可经由多种不同转染(transfection)技术导入细胞内，并对特定基因产生具专一性的敲弱(knockdown)效果。因此可利用经过适当剪裁的 siRNA之互补性，来对已知序列的基因进行标定，这种现象使siRNA成为研究基因功能与药物目标的一项重要工具。

对于肿瘤的治疗而言，抑制肿瘤细胞的增殖是常见的治疗途径。对于抑制肿瘤细胞增值，主要有以下几种途径。

细胞凋亡(apoptosis)，是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡过程。细胞凋亡受到多个基因严格调控，包括Caspase 家族，Bcl2家族，癌基因如C-myc、抑癌基因P53等。

细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后，送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用。目前对自噬在学术界存在三种不同的观点：①自噬可作为始因诱导凋亡的发生，阻断自噬将延缓凋亡，而广谱Caspase抑制剂虽能有效抑制凋亡的发生，但对自噬却不产生影响；②低程度的自噬可拮抗凋亡的发生，在此时若阻断自噬则会增加细胞对凋亡信号的敏感性；③自噬与凋亡相互独立存在，抑制其中任何一条途径都会将细胞推向另一程序性死亡。综上所述，自噬是维持细胞的内平衡，协助维持细胞回归正常状态的重要机制。

由于自噬是维持细胞的内平衡，协助维持细胞回归正常状态的重要机制。因此，如果能够提供新的治疗组合物，通过诱导癌细胞自噬，可以做为癌症治疗，特别是食管癌治疗的备选方案之一。

发明内容

所要解决的技术问题

目前食管癌治疗药物的报道很少，本发明发现TQ能够抑制食管癌细胞的增殖，同时对于食管癌细胞的凋亡和自噬两个抑制食管癌细胞增殖途径中同时具有促进作用。因此可以在预防或者治疗食管癌的药物中添加 TQ的成分达到目的。

解决技术问题的手段

本发明的一个方式为胸腺醌TQ在制备治疗癌症的药物组合物中应用。本发明的胸腺醌TQ对于癌细胞具有明显的