[发明专利]一种冶炼厂退役渣场重金属污染土壤的微生物修复方法

权利要求书

1.一种用于修复受污染土壤的复合微生物，其特征在于，为均处于对数期的硫酸盐还原菌与铁还原菌按菌液体积比1:1的混合培养物；

其中，硫酸盐还原菌的分类名称为：Uncultured sulfate-reducing bacterium SRB-4，保藏单位为：中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，保藏日期为：2015年9月14日，保藏编号为：CCTCC NO：M2015535；

铁还原菌的分类名称为：脂环酸杆菌(Alicyclobacillus sp.)Biometek-B，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：中国科学院微生物研究所，保藏日期为：2012年12月26日，保藏号为：CGMCC NO.7039。

2.一种用于培养如权利要求1所述的用于修复受污染土壤的复合微生物的共培养培养基，其特征在于，该培养基配制方法为：将乳酸钠0-3.5g，NH₄Cl 0-1.0g，Na₂SO₄ 0-1.0g、MgSO₄ 0-0.1g、K₂HPO₄ 0-0.5g，(NH₄)₂Fe(SO₄)₂·6H₂O 0-0.65g和CaCl₂ 0-0.1g溶于1L蒸馏水中，使用1mol/L的H₂SO₄或NaOH调整pH为7.0-7.2；然后将化学纯ZnSO₄、PbCl₂、K₂Cr₂O₇、Fe(NO₃)₃固体加入1L培养基中，调整Zn²⁺浓度为0.5g/L，Pb²⁺浓度为0.5g/L、Cr⁶⁺浓度为20mg/L，Fe³⁺浓度为2-3g/L。

3.一种冶炼厂退役渣场重金属污染土壤的微生物修复方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将权利要求1所述的用于修复受污染土壤的复合微生物接种于权利要求2所述的培养基，在30℃-35℃条件下置于150-160r·min^-1的空气浴恒温振荡器培养3-4天，至菌液细菌浓度为8.3×10⁷～9.8×10⁷个/mL；

2)对步骤1)培养后的复合微生物，采用梯度提高Zn²⁺，Pb²⁺、Cr⁶⁺浓度进行驯化，得到高耐受重金属的复合微生物的菌液,菌液细菌浓度为8.2×10⁷-9.6×10⁷个/mL；

3)接种步骤2)培养后的菌液到污染的土壤中，于30℃-35℃下培养4-7天后，土壤得到修复。

4.如权利要求3所述的微生物修复方法，其特征在于，步骤1)中所述菌种接种体积为培养基体积的10％-15％，初始供接种的复合微生物细菌浓度为7.5×10⁷-8.8×10⁷个/mL。

5.如权利要求3所述的微生物修复方法，其特征在于，步骤2)所述驯化方法为：每次复合微生物的接种体积为培养基体积的8％-12％，30℃-35℃条件下置于150-160r·min^-1的空气浴恒温振荡器培养3-4天，培养基中Zn²⁺，Pb²⁺、Cr⁶⁺分别按照200mg/L、200mg/L、20mg/L的浓度梯度逐级增加至Zn²⁺浓度达到2.2g/L，Pb²⁺浓度达到1.8g/L、Cr⁶⁺浓度达到100mg/L，每次培养待复合微生物细菌浓度达到7.0×10⁷～8.0×10⁷个/mL进行下一级驯化培养。

6.如权利要求3所述的微生物修复方法，其特征在于，步骤3)所述菌液添加量为土壤与菌液的质量体积比g:mL为1:1-3:1。