[发明专利]建立三阴性乳腺癌活体肿瘤组织小鼠原位移植模型的方法

说明书

本发明公开了一种建立三阴性乳腺癌活体肿瘤组织小鼠原位移植模型的方法，包括：(1)在免疫缺陷小鼠的颈部皮下埋植雌二醇缓释片；(2)经手术选取临床三阴性乳腺癌患者的三阴性乳腺癌活体肿瘤组织，然后将所述三阴性乳腺癌活体肿瘤组织切割成体积为4‑15mm³的接种瘤块；(3)将所述接种瘤块原位移植到所述免疫缺陷小鼠的乳腺脂肪垫内；以及(4)对所述免疫缺陷小鼠进行饲养30‑80天，建立三阴性乳腺癌活体肿瘤组织小鼠原位移植模型。该方法能够提高雌性小鼠模型体内的雌激素水平，满足三阴性乳腺癌组织生长的需求，使得出肿瘤结节的时间早，模型构建时间缩短，成瘤率提高了近4倍，模型构建方法简单易行。

技术领域

本发明涉及一种肿瘤组织原位模型建立的方法，特别是关于一种建立三阴性乳腺癌活体肿瘤组织小鼠原位移植模型的方法。

背景技术

临床上，乳腺癌已经成为女性恶性肿瘤的首位，其治疗方法和研究也在不断的进步中。其中，三阴性乳腺癌是一种特殊的乳腺癌亚型，约占乳腺癌病理类型的10.0％～20.8％，此病预后较差，死亡风险较高，目前还没有特有的针对三阴性乳腺癌的治疗指南。

由于三阴性乳腺癌缺少ER、PR和HER2的表达，内分泌治疗和针对HER2的靶向治疗对这种癌症不管用。虽然三阴性乳腺癌对化疗比较敏感，但通过全身的常规辅助化疗，通常只有约20％患者有很好的化疗效果。因此，尽快筛选出对临床三阴性乳腺癌患者有效的药物，是迫在眉睫。

乳腺癌动物模型是研究乳腺癌生物学行为及进行实验治疗的重要工具之一，被普遍应用于抗乳腺癌的药物筛选和药效实验中。根据乳腺癌模型建立方法不同，可分为自发性、诱发性、移植性和转基因性四类，所用的动物一般为免疫缺陷小鼠。

移植性模型一般选用的是乳腺癌肿瘤细胞株。但人源肿瘤细胞系统经长期体外培养后，其肿瘤学生物行为、基因谱表达水平与肿瘤异质性都与肿瘤组织有较大差异，在预测临床药效实验结果方面的作用不佳。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

本发明的目的在于提供一种建立三阴性乳腺癌活体肿瘤组织小鼠原位移植模型的方法，其使得出肿瘤结节的时间早，缩短了模型的构建时间，成瘤率高。

为实现上述目的，本发明提供了一种建立三阴性乳腺癌活体肿瘤组织小鼠原位移植模型的方法，包括如下步骤：(1)在免疫缺陷小鼠的颈部皮下埋植雌二醇缓释片；(2)经手术选取临床三阴性乳腺癌患者的三阴性乳腺癌活体肿瘤组织，然后将所述三阴性乳腺癌活体肿瘤组织切割成体积为4-15mm³的接种瘤块；(3)将所述接种瘤块原位移植到所述免疫缺陷小鼠的乳腺脂肪垫内；以及(4)对所述免疫缺陷小鼠进行饲养30-80天，建立三阴性乳腺癌活体肿瘤组织小鼠原位移植模型。

在一优选的实施方式中，步骤(1)中，上述免疫缺陷小鼠是NCG雌性小鼠。

在一优选的实施方式中，步骤(1)中，上述雌二醇缓释片的剂量是0.36mg/片，缓释时间为60天。

在一优选的实施方式中，步骤(2)中，上述三阴性乳腺癌活体肿瘤组织切割成体积为8mm³的接种瘤块。

在一优选的实施方式中，步骤(2)中，经手术选取的三阴性乳腺癌活体肿瘤组织先浸泡在含有青链霉素双抗的保存液中，低温运输，送达实验室后用无菌保存液冲洗；然后在显微镜下钝性分离三阴性乳腺癌活体肿瘤组织的包膜，并剔除脂肪组织、坏死组织。

在一优选的实施方式中，上述低温运输时的温度是4℃。

在一优选的实施方式中，上述无菌保存液冲洗的次数是3次。

与现有技术相比，根据本发明具有如下有益效果：