[发明专利]一种生物素三肽-1液相合成方法

权利要求书

1.一种生物素三肽-1液相合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)生物素-N-羟基琥珀酰亚胺酯的制备：在反应装置中，搅拌下依次加入100ml四氢呋喃、20g生物素、10.4gN-羟基琥珀酰亚胺和20.27g1,3-二环己基碳二亚胺，升温回流反应，过滤，滤液减压浓缩得到白色固体；

2)Biotin-Gly-OH的制备：在反应装置中，搅拌下依次加入100ml水、100ml四氢呋喃、步骤1)所得的15g生物素-N-羟基琥珀酰亚胺酯和3.96g甘氨酸，用30％氢氧化钠溶液调pH＝8.5，室温反应，反应完后调pH＝2析出大量固体，过滤，滤饼用水淋洗，真空干燥得到白色固体；

3)Biont-GHK(Boc)-OH的制备：在反应装置中，搅拌下依次加入50ml四氢呋喃、步骤2)所得的Biontin-Gly-OH5g，冰浴降温下加入2.82gN,N'-羰基二咪唑,当反应液不再冒气泡时把料液滴到7.63gHis-Lys(Boc)-OH和2.01g三乙胺的四氢呋喃溶液中，滴完后室温反应，反应完减压浓缩得到油状物，加入20ml水和50ml乙酸乙酯，用盐酸溶液调pH＝2.0～2.5,有机相用盐水洗涤；5g无水硫酸镁干燥，减压浓缩得到黄色油状物；

4)生物素三肽-1的制备：在反应装置中，搅拌下依次加入4M的盐酸30ml和步骤3)所得5gBiotin-GHK(Boc)-OH，室温反应，反应完后向料液中滴加有机溶剂，静置养晶，24小时后过滤，真空干燥得到生物素三肽-1；

步骤1)中回流反应时间控制为1-3小时；

步骤2)中控制反应温度为25±5℃，反应时间为1-2小时；

步骤3)中控制反应温度为30±5℃，反应时间为2-3小时；

步骤4)中控制反应温度为25±5℃，反应时间为1-2小时，结晶溶剂为乙腈，养晶温度控制为5±3℃。