[发明专利]糖化血红蛋白检测试剂盒

说明书

本申请涉及糖化血红蛋白检测技术领域，具体公开了一种糖化血红蛋白检测试剂盒，该试剂盒包括第一试剂和第二试剂；第一试剂包括胶乳微球、第一缓冲液以及第一表面活性剂；第二试剂包括蛋白A或蛋白G、以及糖化血红蛋白单克隆抗体、第二缓冲液、第二表面活性剂。通过上述方式，本申请的试剂盒能够稳定地长时间存放，避免了目前市面上的试剂需要将单抗和二抗分别存储，使用期间再混匀使用的繁琐操作。

技术领域

本申请涉及糖化血红蛋白检测技术领域，特别是涉及一种糖化血红蛋白检测试剂盒。

背景技术

现有糖化血红蛋白的检测方法包括离子交换层析法、高效液相色谱法、亲和层析法、放射免疫法、酶免疫法和胶乳微球免疫比浊法。目前常见的胶乳微球免疫比浊直接法测定试剂盒通常为三试剂组分。检测原理为：采用空白胶乳微球颗粒吸附被测样本中的血红蛋白，然后加入特异性识别糖化血红蛋白(HbA1c)的糖化血红蛋白单克隆抗体及对应二抗(通常二抗为羊/兔抗鼠糖化血红蛋白单克隆抗体)，形成抗原抗体复合物(Complexes)，并通过仪器检测透射光或散射光的信号值变化。

本申请的发明人在长期的研发过程中，发现目前，市场上以直接胶乳免疫比浊法测定糖化血红蛋白占主流，该方法是测定糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比，干扰因素少，可配套生化分析仪进行高通量检测。具体方法是将胶乳免疫比浊试剂盒的试剂一中的胶乳微球和溶血后的全血混合，使微球充分吸附血液中的血红蛋白和糖化血红蛋白，再用糖化血红蛋白单克隆抗体特异性结合糖化血红蛋白，然后用抗糖化血红蛋白单克隆抗体抗体(二抗)与血红蛋白单克隆抗体结合而产生颗粒聚集，检测颗粒形成的浊度变化。由于二抗只有两个位点与糖化血红蛋白单抗结合，检测中形成的“胶乳微球-糖化血红蛋白-糖化血红蛋白单抗-二抗”颗粒增大程度有限，检测灵敏度不够。而且，因糖化血红蛋白抗体和二抗长时间在同一体系中共存，可能会出现测试不稳定现象，很多厂家将糖化血红蛋白单抗和二抗分别做成两个包装，即试剂二和试剂三，由检验人员现场混合检测。这增加操作误差，导致结果差异较大。

发明内容

基于此，本申请提供一种糖化血红蛋白检测试剂盒，能够稳定地长时间存放，避免了目前市面上的试剂需要将单抗和二抗分别存储，使用期间再混匀使用的繁琐操作。

为解决上述技术问题，本申请采用的一个技术方案是：提供一种糖化血红蛋白检测试剂盒，试剂盒包括第一试剂和第二试剂；第一试剂包括胶乳微球、第一缓冲液以及第一表面活性剂；第二试剂包括蛋白A或蛋白G、以及糖化血红蛋白单克隆抗体、第二缓冲液、第二表面活性剂。

其中，蛋白A或蛋白G的浓度是0.01-1mg/mL。

其中，糖化血红蛋白单克隆抗体的浓度是0.01-1mg/mL。

其中，胶乳微球的粒径为60-500nm；按质量百分比计，胶乳微球的浓度是0.01-1％。

其中，第一缓冲液是选自甘氨酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、Tris缓冲液、HEPES缓冲液的至少一种。

其中，第一缓冲液是甘氨酸缓冲液和硼酸盐缓冲液的组合；

其中，甘氨酸缓冲液的浓度是10-200mmol/L，硼酸盐缓冲液的浓度是10-100mmol/L。

其中，第二缓冲液是选自甘氨酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、MES缓冲液、HEPES缓冲液、Tris缓冲液、CAPSO缓冲液、MOPS缓冲液的至少一种。

其中，第二缓冲液是甘氨酸缓冲液和硼酸盐缓冲液的组合；其中，甘氨酸缓冲液的浓度是10-200mmol/L，硼酸盐缓冲液的浓度是10-100mmol/L。

其中，第二试剂还包括稳定剂和防腐剂。

其中，稳定剂是选自聚乙二醇、丙三醇、丙二醇、蔗糖、海藻糖、山梨醇、BSA中的至少一种；防腐剂是选自叠氮钠、Proclin 300中的至少一种。