[发明专利]一种用于检测黑色素瘤的长非编码RNA及其应用

说明书

本发明公开了一种与黑色素瘤相关的长非编码RNA及其应用，所述长非编码RNA为LncRNA‑FA2H‑2。通过研究证实LncRNA‑FA2H‑2在黑色素瘤患者组织中表达上调，且通过si‑RNA敲减LncRNA‑FA2H‑2可以显著降低黑色素瘤细胞A357的增殖能力，说明LncRNA‑FA2H‑2可作为黑色素瘤的分子标志物和靶点用于黑色素瘤的诊断和治疗。本发明的有益效果在于，本发明为黑色素瘤的诊断提供了一种生物标志物LncRNA‑FA2H‑2，通过检测该基因的表达可以实现黑色素瘤的早期诊断；其次，本发明提供一种由LncRNA‑FA2H‑2的siRNA在制备黑色素瘤药物组合物的应用，具有重要的临床意义和广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及一种用于检测黑色素瘤的长非编码RNA及其应用。

背景技术

黑色素瘤是皮肤中恶性度最高的原发性皮肤肿瘤，其起源于黑色素瘤细胞，是所有皮肤肿瘤中最具有侵袭性的一种恶性肿瘤。黑色素瘤患者的预后效果较差，患者的生存期短。尽管相较于其他的皮肤癌症，如鳞状细胞癌和基底细胞癌，黑色素瘤较为少见，但是在皮肤恶性肿瘤所引起死亡的病例中，黑色素瘤所引起的死亡约占75％。由于黑色素瘤患者的早期症状不明显，因此患者被诊断时通常已经处于中晚期。因此，研究黑色素瘤的发生发展的具体机制对于提高患者的早期诊断以及提高患者的预后具有十分重要的价值。面前，对于黑色素瘤的研究多集中于传统的蛋白编码基因以及蛋白信号传导等方面，而对于非编码RNA的研究则较少。

长非编码RNA是一类长度大于200碱基的非编码RNA。根据长非编码RNA与蛋白编码基因的位置关系，长非编码RNA被分为五类：正义长非编码RNA，反义长非编码RNA,双向长非编码RNA，内含子长非编码RNA，基因间长非编码RNA。长非编码RNA广泛存在于多种组织中，并且长非编码RNA的表达具有特异性和时空特异性。长非编码RNA具有多种重要的细胞调控功能，能够参与到细胞发育和代谢等多种生命功能调控途径中，包括基因重组、基因印记、细胞周期调控、染色质修饰、转录、翻译、mRNA降解等。大量的研究表明，长非编码RNA与疾病的发病机制有关。现有的研究表明，长非编码RNA在多种肿瘤中出现显著差异，如肝癌、乳腺癌、结直肠癌等。因此，长非编码RNA的不同表达水平可以作为肿瘤发生以及预后的生物标志物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种与黑色素瘤发生发展相关的LncRNA-FA2H-2，通过检测LncRNA-FA2H-2的表达水平以及改变其相关水平来实现黑色素瘤的早期诊断与靶向治疗。

为实现上述目的，本发明提供了一种检测长非编码RNA表达的试剂在制备诊断黑色素瘤产品中的应用，所述长非编码RNA为LncRNA-FA2H-2。

优选地，所述LncRNA-FA2H-2在黑色素瘤患者中表达上调。

优选地，所述试剂包括利用分子信标、SYBR Green、TaqMan探针、双杂交探针检测LncRNA-FA2H-2所使用的特异性引物对或探针。

优选地，所述特异性引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

试剂中还含有：

(1)内参基因GAPDH特异性引物，引物序列如SEQ ID NO.5-6和SEQ ID NO.7-8；

(2)从黑色素瘤组织和癌旁组织中提取总RNA所需的试剂；

(3)以总RNA为模板将LncRNA-FA2H-2逆转录为cDNA所需的试剂；

(4)将cDNA实时定量PCR所用试剂。

此外，本发明提供了一种用于治疗黑色素瘤的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物所述LncRNA-FA2H-2的siRNA。