[发明专利]一种贻贝寡糖单一组分MOS-1的制备方法

说明书

本发明提供了一种制备贻贝寡糖单组分MOS‑1的方法，原工艺制备得到的贻贝寡糖为混合物，不满足药物申报要求，本发明提供了一种能够制备高纯度贻贝寡糖单组分的方法，制备得到的贻贝寡糖单组分纯度达到95.38％；并且，贻贝寡糖MOS‑1能显著降低大鼠血清中甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇含量。

技术领域

本发明涉及一种寡糖的制备方法，尤其涉及一种贻贝寡糖单一组分的制备方法。

背景技术

贻贝，又名海红，味道鲜美，营养丰富，是海洋贝类养殖中的重要种类。除食用外，贻贝干品还是一种重要的药材，具有补肾壮阳，益精养血，消瘿散结等功能。现代研究表明，贻贝肉含有大量蛋白质和多糖，其中多糖具有降1血脂、预防心脑血管疾病、提高免疫力、抗肿瘤等功效。

申请人在申请号为201710351379.4的发明专利中提供了一种贻贝多糖的结构，并通过实验证明该多糖具有显著的降血脂功效。申请人在申请号为201710550343.9的发明专利申请中提供了一种贻贝寡糖的制备方法，并通过实验证明该寡糖混合物能显著降低高血脂大鼠血清中甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的水平。申请号为201710550343.9的发明专利申请中提供的方法虽然可以制得贻贝寡糖，主要包括的步骤为：用α-淀粉酶降解贻贝多糖为贻贝寡糖；用酵母菌除去降解产生的葡萄糖、麦芽糖；用活性炭吸附寡糖，低浓度乙醇洗去杂质，高浓度乙醇洗脱寡糖，但制备得到的寡糖是一种混合物，不满足药品开发要求，迫切需要开发能制备寡糖单一组分的方法。

发明内容

本发明提供了一种制备贻贝寡糖单一组分MOS-1的方法；所述制备方法包括如下步骤：

(1)准备贻贝多糖；

(2)将贻贝多糖配置成多糖溶液；

(3)向步骤(2)中的多糖溶液中加入淀粉酶，水解一段时间，得贻贝多糖水解液，之后，过滤，收集滤液，得贻贝寡糖溶液；

(4)将步骤(3)的贻贝寡糖溶液利用凝胶层析分离纯化，收集流出液体积130mL～135mL之间的组分，即可得到贻贝寡糖单一组分MOS-1。

进一步的，所述步骤(4)中凝胶层析所用填料为Biogel-P2，所用层析柱长度为100cm，直径2cm；柱温25℃，流速0.1mL/min-2.0mL/min，优选，0.4mL/min。

进一步的，所述步骤(2)中多糖溶液中贻贝多糖的重量体积浓度为0.5％-10％，优选，1％-2％。优选的，还包括调节多糖溶液的pH为4.0-6.0的步骤，优选，所述pH为4.5-5.5。

进一步的，所述步骤(3)中淀粉酶为中温α-淀粉酶，淀粉酶加入的终浓度为0.1g/L-1g/L，优选，0.2g/L-0.5g/L；水解温度为40℃-60℃，优选，50℃；水解时间为10min-60min，优选，20min-40min，更优选，30min；任选的，水解之后还包括灭酶的步骤。

进一步的，所述步骤(3)中采用0.1μm-0.5μm(优选，0.22μm)的滤膜对贻贝多糖水解液进行过滤。

进一步的，所述步骤(4)在利用凝胶层析分离纯化之前，还包括将步骤(3)的贻贝寡糖溶液调至总糖浓度为50mg/mL-200mg/mL的步骤，优选，调至总糖浓度为100mg/mL。

另一方面，本发明还提供了一种贻贝寡糖单一组分MOS-1，其采用上述方法制备得到。

另一方面，本发明还提供了贻贝寡糖单一组分MOS-1在制备降血脂的药物中的用途；优选的，所述血脂包括甘油三酯和/或低密度脂蛋白胆固醇。