[发明专利]一株对杂花苜蓿有明显增产效果的根瘤菌株

说明书

本发明涉及中华根瘤菌SJN2017及其应用，属于农业微生物应用领域。所述中华根瘤菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16414。本发明的中华根瘤菌显著提高杂花苜蓿的产量，尤其是内蒙古西部地区广泛种植的耐盐碱苜蓿品种草原3号杂花苜蓿。

技术领域

本发明适于农业微生物的应用领域，本发明主要针对苜蓿的高产栽培条件之一接种根瘤菌而进行的，具体而言，涉及一株中华根瘤菌及利用其提高杂花苜蓿的产量。

背景技术

在苜蓿高产栽培的过程中，采用播前根瘤菌接种，可以有效提高苜蓿牧草产量。其中选择与各苜蓿品种相匹配的有效菌株进行接种是其增产与否的重要环节。而在实际生产中选择最佳匹配的菌株主要考虑寄主植物及种植区的土壤环境两方面因素，通常因土著根瘤菌、土壤养分、与寄主匹配等差异会导致接种效果不佳。

近年来，内蒙古西部地区种植的耐盐碱紫花苜蓿品种大规模推广种植，而且内蒙古的奶业企业伊利、蒙牛等的迅猛发展使得呼和浩特地区的苜蓿种植面积的不断的扩大，但在产量及质量方面与国外相比还有很大的差距。为了获得最大的经济效益，过去在杂花苜蓿的育种、施肥、灌溉、病虫害防治以及苜蓿的收获、加工、运输贮存等关键技术研究方面做了许多工作，但对筛选与之相匹配的根瘤菌株进行接种从而达到最大增加效益的研究尚未见报道，尤其以内蒙古西部地区的盐碱种植环境，因此，在内蒙古西部地区进行根瘤菌的采集并与杂花苜蓿进行各个种植区的匹配筛选，是至关重要的。

发明内容

本发明对杂花苜蓿在内蒙古西部4个试点栽培区(沙尔沁、海流图、内蒙古农业大学校区试验基地、关碾房)进行适宜根瘤菌的匹配筛选，首先分别从其种植区采集苜蓿属互接种族内(苜蓿属和草木樨属的牧草)的根瘤，经分离纯化及16SrDNA鉴定分类后，进一步进行室内初步筛选及田间复筛，通过对接种后苜蓿植株的生长情况的测定，分析筛选对杂花苜蓿增产效果明显的根瘤菌株，为这些试点区杂花苜蓿的高产栽培提供依据。

从沙尔沁、海流图、内蒙古农业大学校区试验基地、关碾房4个苜蓿栽培基地，采集苜蓿属互接种族内牧草材料的根瘤，从中分离纯化得到17份苜蓿根瘤菌菌株，并通过16SrDNA进行鉴定；经各项生长指标分析，通过室内无菌试验初步筛选得到土著根瘤菌株促生能力强于商用菌株DZ，其中JZ9表现较为优异，将其命名为SJN2017。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一株中华根瘤菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16414，保藏日期为2018年09月03日，保藏地址为北京市朝阳区北辰路1号院3号。该菌采集自内蒙古西部苜蓿种植区的土著根瘤菌株。经鉴定，是一株中华根瘤菌(Sinorhizobium sp.)，命名为SJN2017。

保藏信息：

分类命名：中华根瘤菌(Sinorhizobium sp.)；

保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；

保藏编号：CGMCC No.16414；

保藏日期：2018年09月03日；

保藏地址：北京市朝阳区北辰路1号院3号。

本发明还提供了一种接种根瘤菌促进苜蓿种子增产提质的应用方法，包括以下步骤：将灭菌后的椰砖基质装入育苗盘，湿润，待含水量70％左右后，每穴放入发芽并浸泡过菌液的种子1粒，再加入中华根瘤菌(Sinorhizobium sp.)的根瘤菌菌液，分别于生长30d、60d、90d时测定其各生物量指标；其中，苜蓿种子先用95％乙醇浸泡3min后用0.1％HgCl₂灭菌3min后用无菌水清洗10次。将灭菌后的种子在无菌的培养皿内发芽48h，幼苗长0.5～1cm；而根瘤菌液采用如下方法制备：用不加琼脂的YEMA培养基培养菌株4天，测其OD值λ＝600为0.5左右。