[发明专利]一种用于从血清中检测叶酸含量的解离剂及检测方法

说明书

本发明涉及一种用于从血清中检测叶酸含量的解离剂及检测方法，包括蛋白变性剂、蛋白水解酶、表面活性剂和基础液，其中各组分的用量为：每100ml解离剂中含有蛋白变性剂3～8g，蛋白水解酶1000～3000U，表面活性剂0.2～0.8ml，余量为基础液。与现有技术相比，本发明具有方法简单，灵敏度高、检测结果准确等优点。

技术领域

本发明属于体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种用于血清中叶酸含量检测的解离剂。

背景技术

叶酸(Folic Acid)也叫维生素B9，是一种水溶性维生素，因绿叶中含量十分丰富而得名，不过叶酸受不了高温，因此只有生吃才最有效，在自然界中有几种存在形式，其母体化合物是由喋啶、对氨基苯甲酸和谷氨酸3种成分结合而成。叶酸最初于1931年，印度孟买产科医院的医生L.Wills等人发现，1941年，一位美国科学家从菠菜叶子中提纯了叶酸，并搞清了它的分子式。1946年科学家又成功地用人工合成的方法制造出了叶酸，并开始研究它的作用机理。研究结果表明，原来这个不起眼的小分子竟然是DNA复制过程中必须的一种辅酶，没有它，DNA就不能复，细胞便无法分裂，可是细胞中蛋白质的合成却不受影响，于是红血球中的蛋白便越积越多，体积自然也就越来越大，但数量却不见增长，这就是贫血症的病因。正在发育的胎儿每天都要进行大量的细胞分裂，需要很多叶酸，孕妇体内的叶酸被大量征用，结果便造成了自身的贫血。

叶酸(Folic Acid)是一组化学结构相似，生化特征相近的化合物的统称，由蝶啶、对氨基苯甲酸与1个或多个谷氨酸结合而成。叶酸亦称维生素M，是淡橙黄色结晶或是薄片，分子式是C₁₉H₁₉N₇O₆，分子量是441.4，熔点是250℃，溶于热稀盐酸和硫磺，略溶于乙酸、酚吡啶、氢氧化碱及碳酸碱溶液，在乙醇、丁醇、醚、丙酮、氯仿和苯溶液中不溶。进入机体的叶酸在二氢叶酸还原酶作用下转变为二氢叶酸，进而转化为四氢叶酸；在丝氨酸羟甲基转移酶的作用下，四氢叶酸活化为5，10-亚甲基四氢叶酸，该反应是可逆的；在亚甲基四氢叶酸还原酶的作用下，5，10-亚甲基四氢叶酸转化为5-甲基四氢叶酸；同型半胱氨酸、维生素B12，在蛋氨酸合成酶作用下，5-甲基四氢叶酸为其提供甲基，合成蛋氨酸。

总之叶酸最重要的功能就是制造红血球和白血球，增强免疫力，一旦缺乏叶酸，会发生严重贫血，因此叶酸又被称为“造血维生素”。叶酸大致具有以下几种作用：1、有助于预防神经缺陷(也叫做“神经管畸形”)，包括脊柱裂和无脑儿等非常严重的出生缺陷；2、可能还有助于降低宝宝其他类型的出生缺陷的风险，比如唇腭裂和某些心脏缺陷；3、预防孕妇贫血，孕妇的身体需要叶酸来制造正常的红细胞。4、对于DNA和细胞的基本结果都非常重要；5、服用含叶酸的多种维生素，可能会减少孕妇患先兆子痫的风险。

目前，测定叶酸的免疫学方法有放射性免疫法(RIA)、酶联免疫法(ELISA)、化学发光免疫分析等，例如RIA存在放射性污染、标记物半衰期短、对操作者具有放射性损伤，且操作繁琐，时间长等缺点；而ELISA灵敏度低，检测范围窄。化学发光免疫分析技术具有较高的检测灵敏度和准确性，但是如何将血清样品中的叶酸从结合蛋白中完全解离以获得准确的检测结果仍然是一项技术难题。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种用于从血清中检测叶酸含量的解离剂及检测方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种用于从血清中检测叶酸含量的解离剂，其特征在于，包括蛋白变性剂、蛋白水解酶、表面活性剂和基础液，其中各组分的用量为：

每100ml解离剂中含有蛋白变性剂3～8g，蛋白水解酶1000～3000U，表面活性剂0.2～0.8ml，余量为基础液。

所述的蛋白变性剂为尿素。尿素可以破坏血清中叶酸蛋白变性，让叶酸蛋白的肽链打开，从而使原来包藏在分子内部的-SH暴露。