[发明专利]一种油基钻屑遗传毒性的检测方法在审

专利信息
申请号: 201911416365.1 申请日: 2019-12-31
公开(公告)号: CN111122530A 公开(公告)日: 2020-05-08
发明(设计)人: 崔志松;赵昔龙;李淑君;林忠婷;李建军;高伟 申请(专利权)人: 自然资源部第一海洋研究所;广东省实验动物监测所
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64;G01N30/88
代理公司: 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 代理人: 马金华
地址: 266061 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 油基钻屑 遗传 毒性 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种油基钻屑遗传毒性的检测方法,其特征在于,包括:

1)将油基钻屑样品以人工海水浸提,获得浸提液;

2)将受试物种活体放置到所述浸提液中暴露饲养;

3)收集经暴露饲养的受试物种,研磨组织并制成细胞悬液,检测受试物种的细胞DNA损伤程度;

4)确定油基钻屑的遗传毒性。

2.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤1)中浸提步骤包括:

油基钻屑与人工海水以固液比1:3-6混合浸提,一定时间后离心,取上清液作为浸提液;优选地,固液比1:4;优选地,以150r/min转速浸提,浸提0.5h后以9000r/min转速离心15min并收集上清液。

3.如权利要求1或2所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述的受试物种为诸氏鲻虾虎鱼(Mugilogobius chulae)或海水青鳉。

4.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于,暴露饲养包括以下步骤,按8-15条/组的密度放入烧杯中,每个烧杯加入适量的油基钻屑浸提液,以人工海水作为阴性对照,于暴露24h、48h、72h、96h后收集鱼体。

5.如权利要求4所述的检测方法,其特征在于,暴露实验期间,补加适量超纯水。确保暴露液的浓度和盐度无明显波动。

6.如权利要求1-5中任一项所述的检测方法,其特征在于,步骤3)中检测受试物种细胞DNA损伤程度是通过细胞彗星实验实现的。

7.如权利要求1-6中任一项所述的检测方法,其特征在于,步骤4)是通过包括下述步骤的方法实现的:

对“彗星”图像进行分析,获得彗尾长(TL)、尾DNA含量(TD)、慧尾矩(TM)三项毒性指标;其中,TM=TL×TD;

通过TL、TD、TM确定遗传毒性等级。

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