[发明专利]ssl2084基因在合成中长链脂肪酸中的应用

权利要求书

1.一种ssl2084基因在合成集胞藻中长链饱和脂肪酸中的应用，其特征在于，所述ssl2084基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，合成中长链饱和脂肪酸时集胞藻的培养温度为18℃～20℃或28℃～32℃；

所述集胞藻为集胞藻PCC6803；

所述中长链饱和脂肪酸为C12:0、C16:0、C18:0饱和脂肪酸。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，通过构建过表达中长链脂肪酸的蛋白ssl2084的集胞藻工程菌，然后经扩大培养，诱导培养，提纯，制得中长链饱和脂肪酸。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述集胞藻工程菌的构建过程如下：

(1) 以Pcpc560片段为启动子片段，与ssl2084基因进行基因融合，制得融合片段Pcpc560+ssl2084；

所述Pcpc560 的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

(2) 制备同源重组上游臂slr1285U基因片段，核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

(3) 制备同源重组下游臂slr1285D基因片段，核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；

(4) 用KpnI内切酶酶切步骤(2)制得的同源重组上游臂slr1285U基因片段，与同样经KpnI内切酶酶切的质粒pBluescript SK T1T2连接，制得质粒pBluescript SK T1T2-slr1285U；

(5) 用SacI内切酶酶切步骤(3)制得的同源重组下游臂slr1285D 基因片段，与同样经SacI内切酶酶切的步骤(4)制得的质粒pBluescript SK T1T2-slr1285U连接，制得质粒pBluescript SK T1T2-slr1285UD；

(6) 将步骤(1)制得的融合片段Pcpc560+ssl2084经SalI、EcoRI内切酶酶切后，与同样经SalI、EcoRI内切酶酶切的步骤(5)制得的质粒pBluescript SK T1T2-slr1285UD连接，制得重组载体p5S1285UD-ssl2084；

(7) 用BamHI内切酶酶切质粒pBluescript-Spe，回收壮观霉素抗性Spe片段，与同样经BamHI内切酶酶切的步骤(6) 制得的质粒p5S1285UD-ssl2084连接，制得质粒pBluescriptSK T1T2-slr1285UD-Spe；

(8) 将步骤(7) 制得的重组载体pBluescript SK T1T2-slr1285UD-Spe 转化集胞藻PCC6803，经筛选，制得转基因集胞藻。