[发明专利]一种抗HIV-1 P24的重组抗体

说明书

本发明涉及一种新颖的包含HIV‑1 P24抗原结合结构域的分离的结合蛋白，并对该结合蛋白的制备、应用等方面进行研究。所述结合蛋白包括至少一个互补决定区，其活性强，与HIV‑1 P24蛋白具有很高的亲和力，可广泛应用于HIV‑1 P24蛋白的检测领域。

技术领域

本发明涉及免疫技术领域，具体而言，涉及一种抗HIV-1 P24的重组抗体。

背景技术

人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus；abbr:HIV)，即艾滋病(AIDS，获得性免疫缺陷综合征)病毒，是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒。1981年，人类免疫缺陷病毒在美国首次发现。它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒(Lentivirus)，属逆转录病毒的一种。目前，艾滋病不仅已成为严重威胁我国人民健康的公共卫生问题，且已影响到经济发展和社会稳定。

HIV是艾滋病的病原体，主要通过性接触、血液和母婴传播。近年来，HIV感染患者数量一直呈上升趋势。根据卫生部统计，中国自1985年发现第一例艾滋病病人以来，截至2009年10月底，累计报告艾滋病病毒感染者和病人319877例。2009年当年新发艾滋病病毒感染者4.8万人，我国艾滋病疫情形势依然严峻，性传播正成为主要传播途径。而目前测定血清HIV抗体是诊断HIV感染的常规实验方法，但是测定HIV抗体有局限性：有超过70％的HIV感染者在感染6个月后才能检测出抗体，在同性恋群体，这个数字超过80％，检测抗体方法增加了HIV“窗口期”传播的危险；另外新生儿产生抗体需要出生1年后，来自母亲的HIV抗体会致使假阳产生；由于HIV抗体在疾病过程中的持续存在，只有到艾滋病晚期时消失，无法作为治疗监测的稳定指标。

P24是HIV病毒颗粒的主要结构蛋白，是结构基因GAG的产物，在病毒的包装和成熟过程中起重要作用。P24蛋白的氨基酸序列在HIV各毒株之间高度保守，缺失P24会导致病毒无法正常组装。P24蛋白特异性很强，与多数其他逆转录病毒无交叉反应。HIV感染人体，感染者血液中首先出现的病毒标志物为病毒P24蛋白，从病毒感染到检出HIV抗体之间存在较长的窗口期，因此检测HIV-P24抗原已在HIV感染的早期诊断、患者的预后判断、筛选和评价抗HIV的药物，以及发现母婴传播等方面发挥了重要作用。

HIV-1 P24抗原的检测采用血清学诊断方法，主要有双抗体夹心ELISA法、免疫复合物裂解检测法、超敏感EIA法、酶联免疫荧光法等。目前普遍使用双抗体夹心法检测人类免疫缺陷病毒P24抗原，具有很好的特异性，但是单纯利用物理吸附把单克隆抗体或者多克隆抗体吸附在酶标板上会存在单抗使用量大，活性损失大。传统的临床诊断使用的都是鼠源的单克隆抗体，现有的针对HIV-1P24抗原的抗体灵敏度、特异性上都还不够理想，可选择性的不多，因此市面上对于高活性高亲和力的HIV-1 P24单克隆抗体具有强烈的需求。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明涉及一种新颖的包含HIV-1 P24抗原结合结构域的分离的结合蛋白，并对该结合蛋白的制备、应用等方面进行研究。

其中所述抗原结合结构域包括选自下述氨基酸序列的至少一个互补决定区：或；与下述氨基酸序列的互补决定区具有至少80％的序列同一性且与HIV-1 P24具有K_D≤1.74×10^-9的亲和力；

互补决定区CDR-VH1为D-X1-S-F-T-X2-Y-T-X3-H，其中，

X1是S、Y或T，X2是P或A，X3是I或L；

互补决定区CDR-VH2为I-N-P-Y-N-X1-T-S-X2-N-Q-K-F-X3-G，其中，

X1是Q、N或GG，X2是S、Y或T，X3是Q或N；

互补决定区CDR-VH3为A-R-X1-G-Y-D-R-E-G-X2-Y-Y-X3-M-D-Y-X4-G，其中，