[发明专利]一种结合抗原A的单克隆抗体及应用其的检测试剂盒

权利要求书

1.一种单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为结合抗原A的单克隆抗体，A的结构式如下，

其中n3连接臂，R为偶联蛋白；

所述单克隆抗体包含重链可变区的VHCDR1-3和轻链可变区的VLCDR1-3；

VHCDR1：GGCTACACCTTTACTACCTACTGG

VHCDR2：ATTAATCCTACCATTGGTTATACT

VHCDR3：GCAAGATTGGGAAACTATAATAAGGGCTATGCTATGGACTAC；

VLCDR1：GAAAGTGTTGATAATTATGGCTTTAGTTTT

VLCDR2：GCTGCATCC

VLCDR3：CAGCAAAGTAAGGAGGTTCCGTGGACG。

2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NOs：1-3所示：

SEQ ID NO：1ESVDNYGFSF

SEQ ID NO：2AAS

SEQ ID NO：3QQSKEVPWT。

3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NOs：4-6所示：

SEQ ID NO：4GYTFTTYW；

SEQ ID NO：5INPTIGYT；

SEQ ID NO：6ARLGNYNKGYAMDY。

4.一种单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、构建如权利要求1-3任意一项所述的重链可变区VHCDR1-3的人鼠嵌合gamma链和alpha链，其中Fc是人源的；

S2、构建如权利要求1-3所述的轻链可变区VLCDR1-3的鼠源kappa链。

S3、将gamma链质粒和kappa链质粒共转染细胞，表达纯化获得含人源Fc的重组单克隆抗体IgG；

S4、将alpha链质粒和kappa链质粒共表达，获得重组单克隆抗体IgA。

5.一种单克隆杂交瘤细胞，其特征在于，由权利要求1-3任意一项所述抗原A免疫动物获得且分泌得到权利要求1-3任意一项所述单克隆抗体。

6.一种单克隆杂交瘤细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将抗原A以50-100ug/次皮下注射免疫鼠类，每40-50天重复一次，重复10-20次；

S2、取阳性鼠脾细胞与鼠骨髓瘤细胞SP/20融合，筛选获得单克隆细胞。

7.一种权利要求1所述的单克隆抗体在制备抗酿酒酵母细胞壁多糖抗体或抗甘露多糖抗体定量测定试剂盒中的用途。

8.一种权利要求7所述的抗酿酒酵母细胞壁多糖或抗甘露多糖抗体定量检测试剂盒在克罗恩病早期诊断中的应用。

9.一种权利要求7所述的抗酿酒酵母细胞壁多糖或抗甘露多糖抗体定量检测试剂盒在克罗恩病分期中的应用。