[发明专利]一种抗CK18单克隆抗体及其应用

权利要求书

1.一种抗CK18单克隆抗体，其特征在于，所述抗CK18单克隆抗体包含重链可变区的VHCDR1-3和轻链可变区的VLCDR1-3；

VHCDR1：GGATACACATTCACTGAATACAGC

VHCDR2：ATAAATCCTAACAATGGTGGAACT

VHCDR3：GCAAACTAGGTTACGACGGTTTGCCTAC

VLCDR1：CAGAGCCTTGTTCACAGTAATGGAAACACCTAT

VLCDR2：AAAGTTTAC

VLCDR3：TCTCAAAGTACACATGTTCCGTGGACG。

2.根据权利要求1所述的抗CK18单克隆抗体，其特征在于，所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NOs：1-3所示：

SEQ ID NO：1GYTFTEYS

SEQ ID NO：2INPNNGGT

SEQ ID NO：3ANYGYDGFAY。

3.根据权利要求1所述的抗CK18单克隆抗体，其特征在于，所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NOs：4-6所示：

SEQ ID NO：4QSLFHRNGNTY

SEQ ID NO：5KVY

SEQ ID NO：6SQSTHVPWT。

4.一种根据权利要求1所述的抗CK18单克隆抗体在CK18-M30包被抗体的应用。

5.根据权利要求4所述的抗CK18单克隆抗体在CK18-M30包被抗体的应用，其特征在于，所述CK18-M30单克隆抗体由杂交瘤细胞株分泌，该杂交瘤细胞株，于2016年3月6日宝藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：C201646。

6.一种根据权利要求1所述的抗CK18单克隆抗体在制备CK18-M65免疫检测工具中的应用；

所述免疫检测工具包括CK18-M65试剂盒。

7.权利要求1所述的抗CK18-单克隆抗体在制备检测CK18相关性肝病诊断试剂中的应用。

8.一种权利要求1所述的抗CK18单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述CK18的单克隆抗体由杂交瘤细胞株分泌产生；所述杂交瘤细胞株制备方法包含以下步骤：

1)合成含有CK18蛋白N端第237至第246位的一段10个氨基酸的肽段的CK19抗原表位肽作为免疫抗原；

2)用1)制备的多肽免疫小鼠；

3)骨髓瘤细胞悬液和免疫小鼠的脾脏B淋巴细胞进行细胞融合；

4)培养融合后的细胞，测杂交瘤效价，筛选阳性细胞株，获得所述杂交瘤细胞株。