[发明专利]马胚胎冷冻液配方

说明书

本发明公开了马胚胎冷冻液配方，包括血清、糖份溶液、基础液、无机盐溶液和防冻溶液，所述冷冻液配方通过血清、糖份溶液、基础液、无机盐溶液和防冻溶液混合而成，其中所述血清比设为5‑27％，所述糖份溶液占比设为4‑8％，所述基础液占比设为15‑30％，所述维纶纤维占比设为5‑10％，所述防冻溶液的占比设为10‑25％。本发明充分利用血清、糖份溶液、基础液、无机盐溶液和防冻溶液之间的相互配合、相互支持、协同作用，可以达到高效的抗渗透，促进细胞结构的完整性，同时具有多种能量基质、氨基酸、维生素、激素、生长因子和细胞因子，作为胚胎的营养和能量底物可用于取样马胚胎的冷冻，取样胚胎冷冻后的发育率高。

技术领域

本发明涉及胚胎工程技术领域，尤其是马胚胎冷冻液配方。

背景技术

胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期，三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟，称神经沟，沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合，致使神经演变为纵贯胚体的神经管。神经管和神经脊将来演化为神经系统。内胚层随着胚体卷曲成管状，称原肠，原肠依部位又分为前肠、中肠和后肠。

胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。

不同冷冻保护剂及其组合在不同物种胚胎冷冻中的效果和程序差别较大，在施用于具体物种中需要优化冷冻液配方和冷冻保护剂配比以及相应的冷冻程序，目前马胚胎玻冷冻技术仍不完善，特别是对体外胚胎的冷冻效果较差，传统的冷冻液配方整体功能性差，对细胞的冷冻效果差，且制作成本较高，因此，在这里我们提出马胚胎冷冻液配方。

发明内容

本发明针对背景技术中的不足，提供了马胚胎冷冻液配方。

本发明为解决上述现象，采用以下改性的技术方案，马胚胎冷冻液配方，包括血清、糖份溶液、基础液、无机盐溶液和防冻溶液，所述冷冻液配方通过血清、糖份溶液、基础液、无机盐溶液和防冻溶液混合而成，其中所述血清比设为5-27％，所述糖份溶液占比设为4-8％，所述基础液占比设为15-30％，所述维纶纤维占比设为5-10％，所述防冻溶液的占比设为10-25％。

作为本发明的进一步优选方式，所述基础液包括以下重量份数，其中钾2-5份、钠3.5-6份、镁2.5-4.5份、钙0.75-1.5份、磷2.5-5份、铁1-2 份、锌1-2份、铜2.5-5份、锰0.5-1份、碘3-5份、硒3-5份、维生素A 0.7-1.8 份、维生素b₁0.5-1份、维生素c1.4-2.8份、维生素e1.5-2份、生物素3-5 份、维生素b₂1-2.5份。

作为本发明的进一步优选方式，所述基础液还包括以下重量份数，其中钾5份、钠6份、镁4.5份、钙1.5份、磷5份、铁2份、锌2份、铜5份、锰1份、碘5份、硒5份、维生素A1.8份、维生素b₁ 1份、维生素c 2.8份、维生素e 2份、生物素5份、维生素b₂2.5份。

作为本发明的进一步优选方式，所述基础液包括以下重量份数，其中钾2 份、钠3.5份、镁2.5份、钙0.75份、磷2.5份、铁1份、锌1份、铜2.5 份、锰0.5份、碘3份、硒3份、维生素A 0.7份、维生素b₁0.5份、维生素 c1.4份、维生素e1.5份、生物素3份、维生素b₂1份。

作为本发明的进一步优选方式，所述无机盐溶液的溶液百分浓度在 42-76％，选择碳酸氢钠、氯化钾、氯化钙液通过按照1.4:1.5:0.8的比例进行充分混合而成。

作为本发明的进一步优选方式，所述血清设为胎牛血清、新生牛血清、成牛血清中的一种或多种构成的混合物。