[发明专利]子宫内膜干细胞的定向成骨分化培养在审
申请号: | 201911425381.7 | 申请日: | 2019-12-31 |
公开(公告)号: | CN111073849A | 公开(公告)日: | 2020-04-28 |
发明(设计)人: | 王凯 | 申请(专利权)人: | 南昌诺汇医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 南昌卓尔精诚专利代理事务所(普通合伙) 36133 | 代理人: | 贺楠 |
地址: | 330000 江西省南昌市南昌高新技术产业*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 子宫 内膜 干细胞 定向 分化 培养 | ||
1.一种子宫内膜干细胞的定向成骨分化培养方法,其特征在于:
使用1-羟基-4-O-鼠李糖-2-萘甲酸甲酯和鹿瓜尔肽进行诱导培养,1-羟基-4-O-鼠李糖-2-萘甲酸甲酯结构如下:
2.权利要求1所述的培养方法,其特征在于:
成骨诱导液配方:DMEM低糖培养基+10%FBS+15μg/m L 1-羟基-4-O-鼠李糖-2-萘甲酸甲酯+20μg/m L鹿瓜多肽注射液+50μg/m L抗坏血酸。
3.权利要求2所述的培养方法,其特征在于步骤如下:
(1)hEMSCs的原代培养:
(2)对hEMSCs进行传代、纯化、冻存及复苏;复苏后上流式细胞仪检测细胞表面特异性抗原阳性率,鉴定确认为hEMSCs。
(3)诱导培养.
4.权利要求3所述的培养方法,其特征在于:
诱导培养步骤如下:
(1)选用复苏鉴定后的hEMSCs,首先用斯丹赛品牌的人类胚胎干细胞条件培养液培养液培养中1d;
(2)使用成骨诱导液进行诱导培养6-8d,所述成骨诱导液配方:成骨诱导液配方:DMEM低糖培养基+10%FBS+1-羟基-4-O-鼠李糖-2-萘甲酸甲酯+鹿瓜多肽注射液+50μg/m L抗坏血酸。
5.权利要求4所述的培养方法,其特征在于:
所述成骨诱导液配方:成骨诱导液配方:DMEM低糖培养基+10%FBS+15μg/m L 1-羟基-4-O-鼠李糖-2-萘甲酸甲酯+20μg/m L鹿瓜多肽注射液+50μg/m L抗坏血酸。
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