[发明专利]一种肽标签及其在检测或纯化融合蛋白质的应用

说明书

本发明涉及一种源自人半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN(CST1)的肽标签，及能够特异识别上述标签的抗体，及能够产生上述抗体的杂交瘤细胞株和它们的应用。所述肽标签的氨基酸序列为NYFFDVEVGRTI，作为抗体的识别表位或者抗体的结合表位。根据本发明肽标签的高特异性，其具有消除现有标签非特异性反应的特点。同时利用本发明的肽标签及其对于抗体具有高亲和力，能够非常有效地检测或者纯化带有肽标签序列的蛋白质。并且，依据本发明的肽标签及其对应的抗体表位标记系统可以适用于特定蛋白质的细胞内定位，功能鉴定，检测，纯化以及研究蛋白质间的相互作用等的各种领域中。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种肽标签及其在检测或纯化融合蛋白质的应用。

背景技术

重组蛋白纯化的方法很多，其中亲和纯化占据着最大一部分，目前来说最常用的亲和纯化包括his-tag、MBP-tag，S-tag、GST-tag等标签纯化，通过标签与配体之间的亲和作用力来实现对重组蛋白的纯化。但是由于这些标签存在特异性差、分子量大、或亲和力不高的问题，对于有些蛋白来说，无法通过这种方法来纯化获得纯度满足要求的重组蛋白。

免疫亲和层析是亲和层析技术的一种，也是近十多年迅速发展起来的一种蛋白纯化手段，被广泛用于分离纯化生物大分子，具有高特异性结合、分离速度快、纯度高等优点；尤其适合于含量少、杂质多，采用常规方法难于分离的生物活性分子。免疫亲和层析是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法，主要应用于生物大分子的分离、纯化。免疫亲和层析的纯化效果主要取决于所用的抗体与配对抗原之间的亲和能力和特异性。因此，抗体的特异性以及与抗原之间的亲和力成为了免疫亲和纯化的关键。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对于检测或者纯化目的蛋白质简易有效的新型肽标签，具有高度的特异性，能够消除现有标签非特异性反应。另外，本发明的目的还在于，提供利用该肽标签及其抗体的相互作用可以适用于特定蛋白质的细胞内定位、功能鉴定、检测、纯化以及研究蛋白质间的相互作用等的各种领域中。

本发明的目的通过以下技术方案实现：一种肽标签，所述肽标签的氨基酸序列为NYFFDVEVGRTI，作为抗体的识别表位或者抗体的结合表位。

本发明还提供一种肽标签融合蛋白，所述肽标签融合蛋白连接有氨基酸序列为NYFFDVEVGRTI的肽标签。

本发明还提供一种抗体，所述抗体的识别表位或结合表位包含有氨基酸序列为NYFFDVEVGRTI的肽标签。

分泌产生所述抗体的杂交瘤细胞株为4E7，于2017年12月28日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(北京)，保藏号为CGMCC No.15198。

所述抗体的CDR的氨基酸序列为：

CDR L1：QGINSY；

CDR L2：GAND；

CDR L3：LQYSGFPYT；

CDR H1：GFTFTGYY；

CDR H2：IRGSANGNTR；

CDR H3：ARSTSYGGYRGYYGMGY。

本发明还提供一种肽标签在检测或纯化融合蛋白质的用途，所述肽标签的氨基酸序列为NYFFDVEVGRTI，所述融合蛋白质包括目的蛋白以及目的蛋白所连接的氨基酸序列为NYFFDVEVGRTI的肽标签，所述肽标签在检测或纯化融合蛋白质中的用途通过对应于所述肽标签的抗体实现。

本发明还提供一种抗体在检测或纯化融合蛋白质的用途，所述抗体的CDR的氨基酸序列为：

CDR L1：QGINSY；

CDR L2：GAND：