[实用新型]检测抗除草剂蛋白CP4-EPSPS的胶体金试纸条有效

专利信息
申请号: 201920157260.8 申请日: 2019-01-29
公开(公告)号: CN209460270U 公开(公告)日: 2019-10-01
发明(设计)人: 曾海娟;唐雪明;王金斌;武国干;刘华;赵琦 申请(专利权)人: 上海市农业科学院
主分类号: G01N33/577 分类号: G01N33/577;G01N33/558;G01N33/543
代理公司: 上海开祺知识产权代理有限公司 31114 代理人: 张晓敏;费开逵
地址: 201106 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 灵敏度 胶体金试纸条 硝酸纤维素膜 抗除草剂 金标垫 底板 检测 单克隆抗体 检测线 蛋白 检测结果 快速检测 依次相连 胶体金 吸水垫 样品垫 质控线 种检测 转基因 耦联的 包被 大豆 玉米
【说明书】:

一种检测抗除草剂蛋白CP4‑EPSPS的胶体金试纸条,其包括,底板、固定在底板上依次相连的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述金标垫中固定有与胶体金耦联的单克隆抗体mAb1;所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线,硝酸纤维素膜近金标垫端包被单克隆抗体mAb2,作为检测线。该胶体金试纸条可以对转基因抗除草剂CP4‑EPSPS蛋白进行快速检测,检测结果准确,具有良好的特异性和较高的灵敏度,检测CP4‑EPSPS蛋白灵敏度可达到5ng/mL,检测含CP4‑EPSPS蛋白的大豆灵敏度可到0.01%,检测含CP4‑EPSPS蛋白玉米的灵敏度可到0.1%。

技术领域

实用新型属于转基因蛋白的检测领域,具体涉及一种检测抗除草剂蛋白CP4-EPSPS的胶体金试纸条。

背景技术

2016年,全球转基因作物种植面积以3%~4%的速度持续增长了21年,已达到1.85亿公顷。在转基因种植产业如此快速发展的形势下,转基因作物及其产品的安全性依然是消费者最关注的问题之一。世界各国为了保护消费者的知情权,对转基因产品的标识做出了明确的法律规定,我国采取强制性标识制度,转基因成分检测室监督管理及正确标识的手段。

目前,转基因检测技术主要为基因层面的检测及基于蛋白层面的检测。在基因水平上主要采用聚合酶链式反应(PCR),利用不同转基因品种的特异性基因对转基因品系进行鉴定,但是,由于该检测技术需要价格昂贵的PCR热循环仪、专业的操作人员、Taq酶等系列试剂耗材等特点,该技术只能在实验室中对转基因作物进行检测,并不适用于田间、物流、储藏、加工等环节的现场快速筛查。

蛋白水平的检测技术主要是转基因金标试纸条,它是利用抗体对转基因蛋白(抗原)的特异反应来实现转基因成分的检测,检测结果肉眼可见,检测仅需5~10分钟,且不需要专业人员操作、对环境要求低、适用于各种场合的现场监督检测,尤其适用于原料产品的转基因检测。

随着我国转基因作物研发和应用进程的不断发展,转基因监管和监测对快速检测技术的需要十分迫切,我国对转基因免疫胶体金试纸条的需求量逐年增高,但是,我国具有研发和生产相关产品的机构很少,多为国外代理产品,价格昂贵,国内自主产权的转基因产品可视化速测技术的研发具有广阔的应用前景和现实意义。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种检测抗除草剂蛋白CP4-EPSPS的胶体金试纸条,可以对转基因抗除草剂CP4-EPSPS蛋白进行快速检测,检测结果准确,具有良好的特异性和较高的灵敏度,解决了现有检测技术中检测转基因抗除草剂农作物对仪器及专业人员依赖的问题,同时,可以改善试纸条长期依赖进口及国外代理的现状。

为了达到上述目的,本实用新型提供如下技术方案:

一种检测抗除草剂蛋白CP4-EPSPS的胶体金试纸条,其包括,底板、固定在底板上依次相连的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫;

所述金标垫中固定有与胶体金耦联的单克隆抗体mAb1,所述单克隆抗体mAb1是抗除草剂蛋白CP4-EPSPS的捕捉抗体;

所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线,硝酸纤维素膜近金标垫端包被单克隆抗体mAb2,作为检测线,检测线上还含有BSA;所述单克隆抗体mAb2是抗除草剂蛋白CP4-EPSPS的检测抗体;硝酸纤维素膜近吸水垫端包被羊抗鼠IgG抗体,作为质控线。

进一步,所述金标垫中,胶体金的粒径为20-40nm。

又,所述硝酸纤维素膜的孔径为10-15μm。

优选地,所述与胶体金耦联的单克隆抗体mAb1的用量为1.2-2.4μg,检测线包被单克隆抗体mAb2的用量为1.5-2mg/mL。

优选地,所述胶体金试纸条的底板后设有支撑背板。

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