[实用新型]一种基于广谱性抗体识别的蔬菜中农药多残留检测试纸条有效
申请号: | 201920558755.1 | 申请日: | 2019-04-23 |
公开(公告)号: | CN210665761U | 公开(公告)日: | 2020-06-02 |
发明(设计)人: | 刘晓晗;王楠;董欣茹;郑永辉;刘强;杨青青;孙霞;郭业民 | 申请(专利权)人: | 山东理工大学 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/531;G01N33/532 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 邓宇 |
地址: | 255086 山东省淄*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 广谱 抗体 识别 蔬菜 农药 残留 检测 试纸 | ||
一种基于广谱性抗体识别的蔬菜中农药多残留检测试纸条,该试纸条包括PVC底板、样品垫、金标垫、检测线、质控线、硝基纤维素膜、吸水垫;所述金标垫上包被有胶体金标记的有机磷农药广谱抗体、氨基甲酸酯类广谱抗体和拟除虫菊酯类农药广谱抗体混合物;所述检测线包被有机磷农药通用抗原、氨基甲酸酯类通用抗原及拟除虫菊酯类农药通用抗原;所述质控线上包被兔抗鼠IgG抗体。通过对试纸条的细节因素的把控,接近被检测农药蛋白质的等电点,从而使其与抗原形成更牢固的结合物。该试纸条可对蔬菜、水果等农产品中大部分有机磷农药、氨基甲酸酯类农药及拟除虫菊酯类农药进行检测,现象直观,灵敏度高。
技术领域
本发明涉及生物工程检测技术领域,采用一种基于广谱性抗体识别的蔬菜中农药多残留检测试纸条对蔬菜中多种农药残留进行一次性检测。
背景技术
我国大部分农业生产中使用化学性农药较多,有时为使得效果更好会超标使用农药。如果不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药,或施用了不该使用的农药,就会引起农药超标或农药中毒。
在我国农药中,70%为有机磷农药,而在我国生产使用的有机磷农药中,70%为剧毒、高毒类,而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。
拟除虫菊酯类农药是20世纪70年代研发的一类仿生合成杀虫剂,是一种可以防治多种害虫的广谱性杀虫剂,具有性质稳定,不宜光解,无特殊臭味,触杀作用强,使用浓度低以及残效时间长等特点。
氨基甲酸酯类农药用作农药的杀虫剂、除草剂、杀菌剂等。
现在实行的农药残留检测方法大部分需要通过有机溶剂提取净化和用大型分析仪器进行,无法对廉价蔬菜进行快速的检测。目前,实验室用于农残检测的方法多为色谱方法或毛细管电泳方法,这类方法检测的周期长、成本高、操作不简便,样本制备复杂,难以及时快速地进行检测。
发明内容
为解决上述问题,本发明提供了一种基于广谱性抗体识别的蔬菜中农药多残留检测试纸条的研发,具体涉及一种在一个试纸条上实现抗原抗体特异性结合从而检测农药残留情况。检测过程相较于市场中存在的农药残留检测仪,操作简单,灵敏度高。本发明通过以下步骤来实现。
为了达到一次性检测多类农残的目的,本发明方法根据果蔬中常见的有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类农药的共性结构,得到与上述农药具有共性结构的半抗原偶联物,分别免疫小鼠,得到识别有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类农药的广谱抗体。通过抗原抗体免疫反应,使试纸条能快速检测出具有特定基团的有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类农药,无需针对每一个有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类农药选择试纸条逐一测试。
一种基于广谱性抗体识别的蔬菜中农药多残留检测试纸条,该试纸条包括PVC底板、样品垫、金标垫、检测线、质控线、硝基纤维素膜、吸水垫,其特征在于:所述样品垫、金标垫、检测线、质控线、硝基纤维素膜、吸水垫均设置在PVC底板的上方,所述样品垫设置在PVC底板的边缘;硝基纤维素膜上靠近金标垫的一端喷涂有检测线,靠近吸水垫的一端喷涂有质控线,从金标垫往吸水垫方向依次为有机磷农药检测线(T1)、氨基甲酸酯类农药检测线(T2)、拟除虫菊酯类农药检测线(T3);所述样品垫和金标垫为玻璃纤维膜,金标垫上包被有胶体金标记的有机磷农药广谱抗体、氨基甲酸酯类广谱抗体和拟除虫菊酯类农药广谱抗体混合物,其中,所述有机磷农药广谱抗体、氨基甲酸酯类广谱抗体和拟除虫菊酯类农药广谱抗体偶联到20~25nm氯金酸胶体颗粒表面所得;所述检测线包被有机磷农药通用抗原、氨基甲酸酯类通用抗原及拟除虫菊酯类农药通用抗原;所述质控线上包被兔抗鼠IgG抗体。
图1为所述有机磷农药通用半抗原;
图2为所述氨基甲酸酯类通用半抗原;
图3为所述拟除虫菊酯类通用半抗原。
本发明所述检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的胶体金免疫层析试纸条的制备方法,包括以下步骤:
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