[发明专利]样品中细胞的分类和计数方法、生物测定试剂盒和微孔阵列板

说明书

提供了一种对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法。该方法包括将多个细胞分别引入多个微孔中，其中，在至少80％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入多个微孔中相应的一个微孔中；向分别位于多个微孔中的多个细胞单独施加第一电流；检测在多个微孔中分别施加有第一电流的多个细胞的第一阻抗值；基于该第一阻抗值的第一分布将多个细胞的第一组分类为第一类型；以及计数多个细胞的第一组的总数。

技术领域

本发明涉及生物测定技术，更具体地说，涉及对样品中的细胞进行分类和计数的方法、生物测定试剂盒和微孔阵列板。

背景技术

红细胞、血小板和白细胞被悬浮在外周血的血浆中。由于检查这些细胞的血液分析可以获得大量临床信息，因此经常检查样本。例如，正常白细胞可分为五种类型：淋巴细胞、单核细胞、嗜碱细胞、嗜酸细胞和中性粒细胞。在正常的外周血中，这些类型的血细胞以一定的比例存在。但是，如果受试者患有疾病，可能会出现特定类型的血细胞数量增加或减少的情况。因此，在临床实验室检测领域，通过对白细胞进行分类和计数，可以获得对疾病诊断非常有用的信息。

发明内容

在一个方面中，本发明提供了一种对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法，包括将多个细胞分别引入多个微孔中，其中，在至少80％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入多个微孔中相应的一个微孔中；向分别位于多个微孔中的多个细胞单独施加第一电流；检测在多个微孔中分别施加有第一电流的多个细胞的第一阻抗值；基于该第一阻抗值的第一分布将多个细胞的第一组分类为第一类型；以及计数多个细胞的第一组的总数。

可选地，该第一电流是直流电或频率不超过100kHz的低频交流电。

可选地，该方法还包括向分别位于该多个微孔中的多个细胞单独施加第二电流，该第二电流为高频交流电；检测在所述多个微孔中分别施加有该第二电流的多个细胞的第二阻抗值；基于该第二阻抗值的第二分布将该多个细胞的第二组分类为第二类型；以及计数该多个细胞的第二组的总数。

可选地，第二阻抗值的第二分布识别多个细胞的第二组和多个细胞的第三组；该方法还包括基于该第二阻抗值的第二分布将多个细胞的第三组分类为第三类型；以及计数多个细胞的第三组的总数。

可选地，高频交流电的频率大于1兆赫。

可选地，该多个微孔中的每一个的直径在15μm至40μm的范围内，深度在25μm至40μm的范围内；该多个微孔中的两个相邻微孔之间的距离在25μm至40μm的范围内。

可选地，将多个细胞分别引入多个微孔中包括将包含悬浮在电解质中的细胞的样品引入包含多个微孔的微孔阵列板上；并且向样品施加电场以将多个细胞分别驱动到多个微孔中。

可选地，电场通过第一导电层和第二导电层分别施加在微孔阵列板的相对两侧，多个微孔夹在第一导电层和第二导电层之间。

可选地，该细胞包括白细胞，该白细胞包括淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞中的一种或其组合。

可选地，在至少95％的多个微孔中，不超过一个细胞被引入多个微孔中相应的一个微孔中。

另一方面，本发明提供了一种用于对样品中的细胞进行分类和计数的生物测定试剂盒，该样品包括悬浮在电解质中的细胞，该试剂盒包括微孔阵列板；以及使用生物测定试剂盒对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法的说明；其中微孔阵列板包括基底；在所述基底上的限定多个微孔的微孔壁层；以及在基底上的包括多对电极的电极层；其中该多对电极中相应的一对位于多个微孔中相应的一个微孔中，并且包括第一电极和第二电极。

可选地，生物测定试剂盒还包括一个或多个电源调节器，用于向分别位于多个微孔中的多个细胞单独施加电流。一个或多个电源调节器能够产生至少两种具有不同频率的电流。