[发明专利]玻璃化冷冻并解冻犬科动物的卵子的方法及冷冻解冻卵子在审
| 申请号： | 201980002421.9 | 申请日： | 2019-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN112118736A | 公开（公告）日： | 2020-12-22 |
| 发明（设计）人： | 金敏奎;南润晳;朴江善;池国斌;李智慧 | 申请（专利权）人： | 艾牧克生物技术有限责任公司;忠南大学校产学协力团 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02;C12N5/075 |
| 代理公司： | 成都超凡明远知识产权代理有限公司 51258 | 代理人： | 洪玉姬;金相允 |
| 地址： | 韩国大*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 玻璃化 冷冻 解冻 动物 卵子 方法 | ||
1.一种玻璃化冷冻并解冻犬科动物的卵子的方法，执行如下所述过程：
采取犬科动物的成熟卵子的过程(1过程)，
执行玻璃化冷冻上述采取的卵子的过程(2过程)；
并包括：
准备混合液、平衡液、玻璃化溶液的过程(2过程-1)；
去除所述回收的卵子的卵丘细胞的过程(denuding)(2过程-2)；
用在室温下平衡的混合液处理所述去除卵丘细胞的成熟的卵子的过程(2过程-3)；
在含有所述卵子的混合液添加平衡液并处理后，再添加平衡液处理的过程(2过程-4)；
再次用平衡液处理经过所述处理的卵子的过程(2过程-5)；
将经过处理的卵子移到玻璃化溶液并处理的过程(2过程-6)及将卵子放到卵子冷冻工具并去除玻璃化溶液后立即浸渍到液氮中保存的过程(2过程-7)。
2.根据权利要求1所述的玻璃化冷冻并解冻犬科动物的卵子的方法，其特征在于，包括：
执行解冻玻璃化冷冻卵子的过程(3过程)；
并包括：
准备解冻液、稀释溶液、洗涤液、恢复培养基的过程(3过程-1)；
在恒温箱中将解冻液(Thawing Solution)加热至35～40℃的过程(3过程-2)；
在恒温箱将恢复培养基(Recovery medium)加热至35～40℃的过程(3过程-3)；
拿出保存在液氮中的卵子冷冻工具(CryoTop)并放入加热的解冻液中，并将附着在卵子冷冻工具(CryoTop)的卵子分离并处理的过程(3过程-4)；
将所述分离的卵子移到在常温下平衡的稀释溶液并处理的过程(3过程-5)；
将所述处理的卵子移到在常温下平衡的两个洗涤液并依次处理的过程(3过程-6)；及
在上述过程后，为恢复培养，在所述预培养的恢复培养基中培养的过程(3过程-7)。
3.一种根据权利要求1或2所述的方法形成的冷冻解冻卵子。
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