[发明专利]用于表征药物产品杂质的系统和方法

权利要求书

1.一种蛋白药物产品，其包含：

蛋白药物和赋形剂，其中所述蛋白药物产品包含0.05％至30.0％(w/w)的中间高分子量蛋白药物杂质。

2.根据权利要求1所述的蛋白药物产品，其中所述蛋白药物产品选自抗体、融合蛋白、重组蛋白或它们的组合。

3.根据权利要求1或2所述的蛋白药物产品，其中所述中间分子量蛋白药物杂质选自具有额外轻链的单体，包括H2L3和H2L4物质；单体+Fab片段复合物；和它们的组合。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的蛋白药物产品，其中所述药物产品包含0.05％至25％w/w的中间高分子量蛋白药物杂质。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的蛋白药物产品，其中所述药物产品包含0.05％至15％w/w的中间高分子量蛋白药物杂质。

6.根据权利要求1-3中任一项所述的蛋白药物产品，其中所述药物产品包含0.05％至10％w/w的中间高分子量蛋白药物杂质。

7.根据权利要求1-3中任一项所述的蛋白药物产品，其中所述药物产品包含0.05％至5％w/w的中间高分子量蛋白药物杂质。

8.一种用于表征中间高分子量蛋白药物产品杂质的方法，其包括：

将蛋白药物产品样品去糖基化；

使用水性流动相通过天然尺寸排阻色谱法分离蛋白药物产品样品的蛋白组分；

通过质谱法分析分离的蛋白组分以表征蛋白药物产品样品中的中间高分子量蛋白药物产品杂质。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述蛋白药物产品样品来自补料分批培养物。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中所述蛋白药物产品选自抗体、融合蛋白、重组蛋白或它们的组合。

11.根据权利要求8-10中任一项所述的方法，其中所述中间高分子量蛋白药物产品杂质被表征为选自以下的中间高分子量蛋白药物产品杂质：具有额外轻链的单体，包括H2L3和H2L4物质；单体+Fab片段复合物；和它们的组合。

12.一种生产抗体的方法，其包括：

在细胞培养物中培养产生所述抗体的细胞；

从所述细胞培养物得到样品；

根据权利要求8-11中任一项所述的方法表征和定量所述样品中的中间高分子量杂质，以及

改变细胞培养物的一种或多种培养条件以减少在所述抗体的细胞培养过程中产生的所表征的低分子蛋白药物杂质的量。

13.根据权利要求12所述的方法，其中为了减少中间高分子量蛋白药物杂质的量而改变的细胞培养物的一种或多种条件选自pH、细胞密度、氨基酸浓度、渗透压、生长因子浓度、搅拌、气体分压、表面活性剂或它们的组合。

14.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述细胞选自细菌细胞；酵母细胞；中国仓鼠卵巢(CHO)细胞(例如CHO K1、DXB-11CHO、Veggie-CHO)；COS细胞(例如COS-7)；视网膜细胞；Vero细胞；CV1细胞；肾细胞(例如HEK293、293EBNA、MSR 293、MDCK、HaK、BHK21)；HeLa细胞；HepG2细胞；WI38细胞；MRC 5细胞；Colo25细胞；HB 8065细胞；HL-60细胞；淋巴细胞细胞，例如自体T细胞；Jurkat(T淋巴细胞)或Daudi(B淋巴细胞)；A431(表皮)细胞；U937细胞；3T3细胞；L细胞；C127细胞；SP2/0细胞；NS-0细胞；MMT细胞；干细胞、肿瘤细胞和从前述细胞中的任一种衍生出的细胞系。

15.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述细胞是杂交瘤细胞或四源杂交瘤细胞。