[发明专利]脂肪酶变体及其组合物在审

申请号：	201980007468.4	申请日：	2019-02-08
公开（公告）号：	CN111788305A	公开（公告）日：	2020-10-16
发明（设计）人：	S.F.克里斯滕森;A.斯文森;J.文德;A.G.桑德斯特罗姆;T.A.波尔森;A.D.富尔顿;C.H.汉森;V.S.尼尔森;K.博尔奇;G.P.吉佩特	申请（专利权）人：	诺维信公司
主分类号：	C12N9/20	分类号：	C12N9/20
代理公司：	北京市柳沈律师事务所 11105	代理人：	张文辉
地址：	丹麦***	国省代码：	暂无信息
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摘要：
搜索关键词：	脂肪酶变体及其组合
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【权利要求书】：

1.一种如SEQ ID NO:2所示的多肽的亲本脂肪酶的变体，其中：

i)所述变体是具有脂肪酶活性的多肽；和

ii)所述变体是与如SEQ ID NO:1所示的多肽具有至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％、但小于100％序列同一性的多肽；和/或

iii)所述变体是由以下多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸与如SEQ ID NO:1所示的成熟多肽编码序列具有至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、但小于100％序列同一性；和/或

iv)所述变体是具有脂肪酶活性的ii)或iii)的多肽的片段；

其中所述变体包含：

(a)对应于以下的取代：D1E；A4R；E56K,N；S83T；L93F；A173Q；T244E；D254S；N94Q,R；R233K；和/或

(b)对应于以下的取代：T252A+L264A；和/或

(c)对应于以下的取代：D1A+252A+L264A；D1F+252A+L264A D1G+252A+L264A；D1H+252A+L264A；D1L+252A+L264A D1M+T252A+L264A；D1R+T252A,+L264A；D1W+252A+L264A；D1Y+252A+L264A；A4R+252A+L264A；D5R+T252A+L264A L7F+T252A+L264A；N8K+T252A+264；N8R+T252A,+264A；F10L+T252A+264A；F10M+T252A+L264A；A19S+T252A+L264A；A20T+T252A+L264A；A20V+T252A+L264A；A46R+T252A+L264A；L75A+T252A+L264A；L75Y+T252A+L264A；N94D+T252A+L264A。

2.如权利要求1所述的变体，其中与亲本脂肪酶(特别是如SEQ ID NO:2所示的脂肪酶)相比，所述变体具有改善的洗涤中稳定性(IWS)。

3.一种组合物，所述组合物包含如权利要求1或2所述的变体。

4.如权利要求1或2中任一项所述的脂肪酶变体或如权利要求3所述的组合物用于水解脂肪酶底物的用途。

5.一种用于清洁表面的方法，所述方法包括使所述表面与如权利要求1或2中任一项所述的脂肪酶变体或如权利要求3所述的组合物接触。

6.一种水解脂肪酶底物的方法，所述方法包括用如权利要求1或2所述的脂肪酶变体或如权利要求3所述的组合物处理所述脂肪酶底物。

7.一种多核苷酸，所述多核苷酸编码如权利要求1或2中任一项所述的脂肪酶变体。

8.一种核酸构建体，所述核酸构建体包含如权利要求7所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸可操作地连接至一个或多个控制序列，所述一个或多个控制序列指导如权利要求1或2中任一项所述的脂肪酶变体在重组宿主细胞中的产生。

9.一种表达载体，所述表达载体包含如权利要求7所述的多核苷酸或如权利要求8所述的核酸构建体。

10.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含如权利要求8所述的核酸构建体或如权利要求9所述的表达载体。

11.一种产生脂肪酶变体的方法，所述方法包括：

a)在适合于表达所述脂肪酶变体的条件下培养如权利要求10所述的宿主细胞；和

b)回收所述脂肪酶变体。