[发明专利]M23A家族蛋白酶的制造方法

权利要求书

1.一种M23A家族蛋白酶的制造方法，其中，

包括如下步骤：

培养导入有编码M23A家族蛋白酶的前蛋白的多核苷酸的芽孢杆菌属菌，从而在该芽孢杆菌属菌的细胞外制造成熟型M23A家族蛋白酶。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，

所述M23A家族蛋白酶为由序列号1、4、7、10或者13的氨基酸构成的多肽，或者，由与序列号1、4、7、10及13中任意一种的氨基酸序列具有至少80％的同一性的氨基酸序列构成且具有肽序列中的甘氨酸-甘氨酸键的分解活性的多肽。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，

所述编码M23A家族蛋白酶的前蛋白的多核苷酸为以下的多核苷酸：

由序列号2、3、5、6、8、9、11、12、14及15中任意一种的核苷酸序列构成的多核苷酸；或

包含编码M23A亚族蛋白酶的前区的多核苷酸和连接于其下游的编码M23A亚族蛋白酶的多核苷酸的多核苷酸。

4.根据权利要求2所述的方法，其中，

所述编码M23A家族蛋白酶的前蛋白的多核苷酸为以下的多核苷酸：

由与序列号2的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号2的523～1062号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；

具有序列号2的1～522号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸；

由与序列号3的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号3的595～1134号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；

具有序列号3的1～594号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的分泌信号及前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸；

由与序列号5的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号5的616～1164号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；

具有序列号5的1～615号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸；

由与序列号6的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号6的709～1257号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；

具有序列号6的1～708号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的分泌信号及前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸；

由与序列号8的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号8的565～1104号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；

具有序列号8的1～564号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸；

由与序列号9的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号9的625～1164号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；

具有序列号9的1～624号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的分泌信号及前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸；

由与序列号11的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号11的529～1065号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；

具有序列号11的1～528号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸；

由与序列号12的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号12的628～1164号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；

具有序列号12的1～627号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的分泌信号及前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸；

由与序列号14的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号14的550～1086号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；

具有序列号14的1～549号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸；

由与序列号15的核苷酸序列具有至少80％同一性的核苷酸序列构成，且在相当于序列号15的628～1164号核苷酸区域的区域具有编码所述M23A家族蛋白酶的核苷酸序列的多核苷酸；或者

具有序列号15的1～627号核苷酸区域的序列或与该序列具有至少80％同一性且编码M23A亚族蛋白酶的分泌信号及前区的序列、及连接于其下游的编码所述M23A家族蛋白酶的序列的多核苷酸。