[发明专利]针对降低受试者中的循环琥珀酸盐水平的靶向干预，以及用于确定所述干预的有效性的试剂盒和方法

说明书

本发明涉及试剂盒，其适合于确定来自受试者的大便样本中生产琥珀酸盐细菌与消耗琥珀酸盐细菌的比，特别是(普雷沃菌科+韦荣球菌科)/(臭菌科+梭菌科)的比，或用于确定在来自受试者的生物流体样本中的琥珀酸盐水平。本发明还涉及用于确定针对降低受试者中的循环琥珀酸盐水平的靶向干预是否有效的方法。最后，本发明涉及用于预防和/或治疗与患者中升高的循环琥珀酸盐水平相关的疾病的靶向干预。

技术领域

本发明涉及针对降低受试者中的循环琥珀酸盐水平的靶向干预。本发明进一步涉及用于确定所述干预的有效性的试剂盒和方法。

背景技术

心血管疾病(CVD)是用于描述心脏和血管疾病的统称，并且构成全世界主要的死亡原因。在发达国家，CVD通常表现为冠状动脉疾病、动脉粥样硬化和高血压，中枢性肥胖作为危险因素起着越来越重要的作用。

活性氧物质的产生以及随后的下游分支与CVD的进展有关。在几种高风险的CVD状态比如高血压(Sadagopan等人，2007，Am.J.Hypertens.20:1209-1215)、缺血性心脏病(Aguiar等人，2014，Cell Commun.Signal.12:78)和2型糖尿病(T2DM)(Guo等人，2017，Nat.Commun.8:15621；Sadagopan等人，2007，Am.J.Hypertens.20:1209-1215；Toma等人，2008，J.Clin.Invest.118:2526-2534；van Diepen等人，2017，Diabetologia 60:1304-1313)中也检测到升高的循环琥珀酸盐水平。在这些情况下，细胞外琥珀酸盐被认为通过其同源受体SUCNR1/GPR91信号传导，在肥厚型心肌病中(Aguiar等人，2014，CellCommun.Signal.12:78)、与肥胖相关的代谢紊乱(McCreath等人，Diabetes.2015Apr；64(4):1154-67)、肾素诱导的高血压(Toma等人，2008，J.Clin.Invest.118:2526-2534)和糖尿病性视网膜病变(Ariza等人，2012，Front.Endocrinol.(Lausanne)3：22)具有病理学意义。

因此，考虑到所述下游效应，循环琥珀酸盐水平的降低似乎是治疗包括CVD和CVD相关病理的不同疾病的有吸引力的策略。琥珀酸盐受体也被建议作为对抗或预防心血管和纤维缺陷的有希望的药物靶标(Ariza等人，2012，Front.Endocrinol.(Lausanne)3:22)。有趣的是，循环琥珀酸盐的确切来源仍然是不清楚。在这方面，已经表明受损的组织可能有助于循环中发现的琥珀酸盐(Ariza等人，2012，Front.Endocrinol.(Lausanne)3：22；Deenand Robben，2011，J.Am.Soc.Nephrol.22:1416-1422)。因此，在本领域中需要针对减少受试者中循环琥珀酸盐水平的有效干预。

发明内容

发明人惊奇地发现，由肠道微生物群的细菌生产的琥珀酸盐是总循环琥珀酸盐水平的主要贡献者。进一步，他们已经能够证明，在来自受试者的大便样本中测量的生产琥珀酸盐细菌与消耗琥珀酸盐细菌的比，特别是(普雷沃菌科+韦荣球菌科)/(臭菌科+梭菌科)的比可能与同一受试者中的循环琥珀酸盐水平相关。

因此，在第一方面中，本发明涉及一种试剂盒，其包括适合于确定来自受试者的大便样本中生产琥珀酸盐细菌与消耗琥珀酸盐细菌的比的试剂，

-其中试剂盒包括设计为与至少一种生产琥珀酸盐细菌和至少一种消耗琥珀酸盐细菌中的16S rRNA基因的高变区特异性杂交的引物组，或

-其中试剂盒包括与至少一种生产琥珀酸盐细菌和至少一种消耗琥珀酸盐细菌中的16S rRNA基因的高变区特异性杂交的探针，

并且其中引物组或探针占形成试剂盒的试剂的总量的至少10％。