[发明专利]淋巴细胞生产方法

说明书

在本发明中，通过在新型重组纤连蛋白片段的存在下培养淋巴细胞，来有效地生长淋巴细胞。

技术领域

本发明涉及可用于医学领域的淋巴细胞的生产方法。

活体主要通过免疫反应来保护免于外来物质。免疫系统由各种细胞以及通过细胞产生的可溶性因子组成。在这些细胞中，淋巴细胞，其为白细胞的一种亚型，起着特别关键的作用。淋巴细胞主要分成三种类型：T细胞（有时称为T淋巴细胞）、B细胞（有时称为B淋巴细胞）和天然杀伤细胞（有时称为NK细胞）。

进一步地，T细胞细分类成辅助性T细胞，其表达CD（簇指名）4，并且主要参与辅助抗体产生和诱导各种免疫反应；细胞毒性T细胞（也称为细胞毒性T淋巴细胞或杀伤性T细胞），其表达CD8并且主要显示出细胞毒性活性；以及其它T细胞。

对于生产淋巴细胞的方法，可以将细胞外基质如基质胶、层粘连蛋白或纤连蛋白用作培养淋巴细胞的底物。

例如，在专利文献1中公开了使用纤连蛋白片段生产淋巴细胞的方法的研究。专利文献1中公开的方法包括在重组纤连蛋白片段如CH-296的存在下，培养祖细胞以有效地诱导、维持或扩增细胞毒性T细胞。然而，这种方法生产细胞毒性T细胞，并且不能有效地生产其它类型的淋巴细胞。

如上所述，尚未建立使用纤连蛋白片段生产各种类型的淋巴细胞的技术。

引用列表

专利文献

专利文献1：WO2005/019450

发明概述

本发明解决的问题

为了解决用于生产淋巴细胞的常规方法的问题，本发明的目的是提供使用纤连蛋白片段生产各种类型的淋巴细胞的方法。

问题的解决方案

本发明人进行了大量研究以实现上述目的。结果，本发明人发现，通过在新型重组纤连蛋白片段的存在下培养淋巴细胞，淋巴细胞得到有效增殖。因此，完成了本发明。

具体地，本发明涉及：

[1]一种生产淋巴细胞的方法，该方法包括在以下的存在下培养淋巴细胞的步骤：

（a）包含人纤连蛋白III-1至3重复的重组多肽，或者包含通过一个或几个氨基酸的取代、缺失、插入或添加而不同于III-1至3重复的氨基酸序列的氨基酸序列的重组多肽；

（b）包含人纤连蛋白III-8至10重复的重组多肽，或者包含通过一个或几个氨基酸的取代、缺失、插入或添加而不同于III-8至10重复的氨基酸序列的氨基酸序列的重组多肽；和

（c）包含人纤连蛋白III-12至14重复的重组多肽，或者包含通过一个或几个氨基酸的取代、缺失、插入或添加而不同于III-12至14重复的氨基酸序列的氨基酸序列的重组多肽；

[2]根据[1]的方法，其中在含有在同一分子内的重组多肽（a）、（b）和（c）的重组多肽的存在下培养淋巴细胞；

[3]根据[2]的方法，其中所述重组多肽是包含SEQ ID NO：19中所示的氨基酸序列的重组多肽，或者包含通过1个或几个氨基酸的取代、缺失、插入或添加而不同于SEQ ID NO：19的氨基酸序列的氨基酸序列的重组多肽；

[4]根据[2]的方法，其中所述重组多肽是包含SEQ ID NO：31中所示的氨基酸序列的重组多肽，或者包含通过1个或几个氨基酸的取代、缺失、插入或添加而不同于SEQ ID NO：31的氨基酸序列的氨基酸序列的重组多肽；

[5]根据[1]至[4]中任一项的方法，其中在重组多肽和抗CD3抗体的存在下培养淋巴细胞；