[发明专利]癌症的长期CAR治疗

说明书

本文提供了瞬时表达嵌合抗原受体(CAR)的细胞群及其在过度增生性疾病例如癌症的长期治疗中的用途。在一些方面，本公开提供了通过长期施用多于一次剂量的经修饰的未刺激的单核细胞群体来治疗癌症的方法，其中所述未刺激的单核细胞获自外周血并用编码嵌合抗原受体的mRNA转染。在一些实施方案中，本公开提供了一种组合物，其包含：瞬时表达由编码嵌合受体的mRNA编码的转基因的转染的单核细胞，其中嵌合受体在转染的单核细胞的表面上表达；和药学上可接受的载体。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年1月5日提交的美国临时申请号62/613,900的优先权和权益，其全部内容通过引用整体并入本文用于所有目的。

背景

嵌合抗原受体(CAR)被用于包括癌症治疗的许多临床应用中。CAR是包括细胞外抗原结合结构域和细胞内T细胞信号传导结构域的重组受体。当在T细胞中表达时，CAR将T细胞重定向以靶向以人白细胞抗原(HLA)非依赖性方式表达靶向抗原的癌细胞。为了产生表达CAR的细胞，将编码CAR的核酸转染到免疫细胞中，然后在具有呈递在表面上的抗原结合区的细胞中稳定表达CAR。抗原结合区与其在受试者中的靶标的结合激活细胞质中的CAR信号传导区，并使免疫细胞繁殖并引发针对带有抗原的细胞的免疫反应，从而破坏这些细胞。嵌合抗原受体(CAR)修饰的T细胞的使用是一种创新的免疫治疗方法。CAR细胞疗法依赖于重新改造T细胞以表达允许细胞识别靶细胞的受体。通常，CAR治疗包括从患者收集T细胞，然后将嵌合抗原离体导入所收集的细胞中，扩增转染的细胞，然后将其输注入患者体内。

向患者施用表达嵌合抗原受体的稳定转染的免疫细胞存在问题。首先，CAR转染的细胞可能导致细胞因子大量快速释放到血液中，并导致细胞因子释放综合征(CRS)，其能够导致发烧、恶心、心跳加快、血压低、呼吸困难和死亡。CAR疗法的另一潜在副作用是脱靶效应，称为B细胞发育不全，其中患者的B细胞被注入的CAR细胞杀死。为了弥补这种副作用，经治疗的患者在余生中必须接受免疫球蛋白治疗。在用稳定转染的CAR-T细胞治疗后，还已经观察到神经毒性和脑肿胀。

发明概述

产生CAR T细胞疗法的一种方法包括使用信使核糖核酸(mRNA)瞬时修饰单核细胞。使用mRNA重新改造患者的单核细胞以表达靶向肿瘤抗原的CAR T细胞可以在几个小时内完成，从而允许现场制备并部署到多个治疗部位。mRNA CAR单核细胞具有有限寿命的安全系数，并具有类似于抗体治疗剂的半衰期。此外，这些细胞缺乏快速的免疫激活和增殖，从而限制了严重细胞因子释放副作用的风险。

本公开内容通过向患者施用瞬时表达嵌合抗原受体的细胞，提供了针对在稳定转染的CAR治疗后观察到的不想要的和危险的副作用的解决方案。这些细胞在有限的时间(在一些情况下约7天)内表达CAR。此外，由于细胞仅瞬时表达CAR，因此它们可以在更长的时间内以多次剂量施用，从而提供用以减少患者症状的长期治疗和具有减少的或没有有害副作用的疾病。

在一些方面，本公开内容提供了通过长期施用多于一次剂量的经修饰的未刺激的单核细胞群体来治疗癌症的方法，其中所述未刺激的单核细胞获自外周血并用编码嵌合抗原受体的mRNA转染。

在一些实施方案中，每天、每周或每月重复剂量。在一些实施方案中，每周重复剂量。在一些实施方案中，每周重复剂量持续至少三周。在一些实施方案中，剂量是1×10⁷或5×10⁷个细胞。

在一些实施方案中，嵌合抗原受体包含抗原结合区、4-1BB共刺激信号区和CD3ζ信号区。在一些实施方案中，抗原结合区是scFv。