[发明专利]以MARCKS磷酸化为指标的AD(阿尔茨海默病)、FTLD(额颞叶变性症)、ALS(肌萎缩侧索硬化症)、PD(帕金森病)和DLB(路易小体型痴呆)的检测

说明书

本发明提供一种高灵敏度且高特异性地检测神经系统变性疾病的方法，所述神经系统变性疾病选自人AD(阿尔茨海默病)、FTLD(额颞叶变性症)和ALS(肌萎缩侧索硬化症)。一种检测神经系统变性疾病的方法，所述神经系统变性疾病选自人AD(阿尔茨海默病)、FTLD(额颞叶变性症)和ALS(肌萎缩侧索硬化症)，所述方法包括以下步骤：(i)对从受试者采集的样本试样中的46位磷酸化的MARCKS蛋白和非磷酸化MARCKS蛋白进行测定；(ii)由(i)中得到的测定值计算下式表示的DO值；[式1][式中，“pSer46‑MARCKS”表示46位磷酸化的MARCKS蛋白的量，“非磷酸化MARCKS”表示非磷酸化MARCKS蛋白的量]；以及，(iii)以DO值为指标检测神经系统变性疾病。

技术领域

本发明涉及一种AD(阿尔茨海默病)、FTLD(额颞叶变性症)、ALS(肌萎缩侧索硬化症)、PD(帕金森病)和DLB(路易小体型痴呆)的检测方法。

背景技术

神经系统变性疾病的临床前期病理学受到很大的关注，需要定量的生物标志物来对这样的早期病态进行测定。

阿尔茨海默病(AD)是最常见的神经系统变性疾病，也是痴呆症的众所周知的病因。

AD病因中最受支持的模型之一是以β-淀粉样蛋白肽(Aβ)在细胞外蓄积而产生的淀粉样蛋白原纤维的细胞毒性为前提的淀粉样蛋白假说。

基于该假说，Aβ已经成为AD的主要治疗靶标。包括巴匹珠单抗(Bapineuzumab)、苏兰珠单抗(Solanezumab)这样的抗体疗法在内的治疗策略是在痴呆症发病后的临床检验中使人AD患者脑中的Aβ聚集下降，但迄今为止的临床症状中痴呆症恢复不充分。结果研究兴趣转移到症状出现前的AD的早期分子事件上，类似的或新的治疗法可能更有效。

本发明人对来自小鼠AD模型和人AD患者的脑组织进行了全面性磷酸化蛋白分析。在多个AD小鼠模型中鉴定出具有异常磷酸化的17种核蛋白。有趣的是，这些变化出现在症状前，而且甚至在模型小鼠的脑中免疫组织学检测出Aβ聚集之前，在某些核蛋白中检测到异常的磷酸化，提示了异常的磷酸化在AD病理的早期阶段发挥重要的作用(参照非专利文献1)。

特别是在定量的质谱中，Ser46位磷酸化的MARCKS(豆蔻酰化的富含丙氨酸的蛋白激酶C的底物)的增加在AD模型小鼠中的Aβ聚集的组织学检测出的1个月前开始，在人AD患者死后也残留在脑中(参照非专利文献1和2)。MARCKS是固定以肌动细胞骨架网络与蛋白激酶C(PKC)为代表的底物的膜下蛋白。通过使用抗pSer46-MARCKS1免疫组织化学法，在AD模型小鼠中症状发病很早前就检测到营养障碍性神经突(dystrophic neurites)，此外检测到人剖检AD脑中老年斑周围的营养障碍性神经突(参照非专利文献2)。而且，表明Ser46位的MARCKS磷酸化使树突棘不稳定并引起神经突变性(参照非专利文献2)。这些结果提供了如下假说：pSer46-MARCKS直到AD的末期阶段，而且可能在其他神经系统变性疾病中，从超早期或临床前期开始可能是可利用的神经突变性的替代生物标志物。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1:Tagawa,K.et al.,Hum.Mol.Genet.24,540-58(2015).

非专利文献2:Fujita,K.et al.,Sci.Rep.6,31895(2016).

发明概述

发明所要解决的问题

本发明的目的在于提供一种高灵敏度且高特异性的神经系统变性疾病的检测方法，所述神经系统变性疾病选自人AD(阿尔茨海默病)、FTLD(额颞叶变性症)、ALS(肌萎缩侧索硬化症)、PD(帕金森病)和DLB(路易小体型痴呆或路易小体病)。

解决问题的技术方案